Purification OF THCA synthase from Cannabis callus

从大麻愈伤组织中纯化 THCA 合酶

基本信息

  • 批准号:
    05671830
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1993
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1993 至 1994
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

The occurrence of DELTA^1-tetrahydrocannabinolic acid synthase was confirmed in the fresh leaf buds of marihuana (Cannabis sativa L.). The enzyme, assayd with cannabigerolic acid, was purified approximately 300-fold by chromatography on diethylaminoethyl-cellulose, phenyl Sepharose CL-4B and hydroxylapatite. The purified protein migrated during sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) as a single band with a molecular mass of 75kD.The native molecular mass determined by gel-filtration chromatography was 74 kDa, indicating that DELTA^1-tetrahydrocannabinolic acid synthase is a monomeric enzyme. Using isoelectric focusing, we determined a pI of 6.4 for the enzyme. The enzyme activity was greatest between pH5.5 and 6.0. The enzyme catalyzed the conversion of cannabigerolic acid or cannabinerolic acid to DELTA^1-tetrahydrocannabinolic acid. The V_<max> values were 2.68 and 0.37 nkat/mg for cannabigerolic acid and cannabinerolic acid, respectively. These results indicated that DELTA^1-tetrahydrocannabinolic acid is predominantly formed from cannabigerolic acid.
证实了DELTA^1-四氢大麻酚酸合成酶在大麻(Cannabis sativa L.)鲜叶芽中的存在。该酶用大麻酚酸测定,用二乙胺乙基纤维素、苯基Sepharose CL-4B和羟基磷灰石层析纯化约300倍。纯化后的蛋白在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中以单带迁移,分子量为75kD。经凝胶过滤层析测定其天然分子质量为74 kDa,表明DELTA^1-四氢大麻酚酸合成酶为单体酶。通过等电聚焦,我们确定了该酶的pI为6.4。酶活性在pH5.5 ~ 6.0之间最高。该酶催化大麻二酚酸或大麻二酚酸转化为DELTA^1-四氢大麻二酚酸。大麻二酚酸和大麻二酚酸的V_<max>分别为2.68和0.37 nkat/mg。这些结果表明DELTA^1-四氢大麻酚酸主要由大麻酚酸生成。

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Futoshi Taura et al.: "New cannabinoid, cannabinerolic acid" from Cannabis sativa Phytochemistry. (in press). (1995)
Futoshi Taura 等人:“新大麻素,大麻酚酸”来自大麻植物化学。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
FutoSHI TAURA: "A New Cannabinoids,Cannabinerlic Acid,from Cannabis Sativa" Phytochemistry. (1995)
FutoSHI TAURA:“一种新的大麻素,大麻二酸,来自大麻”植物化学。
  • DOI:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
FutoSHI TAURA: "A New Cannabinoid,Cannabinerolic acid,from Cannabis Sativa" Phytochemistry. (1995)
FutoSHI TAURA:“一种新的大麻素,来自大麻的大麻酚酸”植物化学。
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