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ヒスタミンH_1受容体を介した心筋ムスカリン性Kチャネル抑制のシグナル伝達系

组胺H_1受体抑制心脏毒蕈碱K通道的信号转导系统

基本信息

批准号：
07670061
负责人：
當瀬規嗣
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

モルモットよりコラゲナーゼ処理により得た単離心房筋細胞を用いて、パッチクランプ法により膜電流を測定した。ヒスタミンを投与してヒスタミンH_1受容体を刺激すると活動電位幅が延長するが、これはH_1受容体刺激によるムスカリン性Kチャネル(K_<Ach>チャネル)の抑制による。このK_<Ach>チャネル抑制作用の細胞内情報伝達系を解明するために、種々のプロテインキナーゼの修飾物質の効果を検討した。ヒスタミンによるK_<Ach>チャネル抑制作用は、Cキナーゼの阻害物質であるH-7やホスホリパーゼCの阻害物質であるNCDCの投与により抑制されず、イノシトールリン脂質代謝系は関与していない。また、8-br-cGMP存在下でもK_<Ach>チャネル抑制作用が観察され、cGMP/Gキナーゼ系の関与も否定される。さらに、セリン/スレオニン残基に結合するリン酸をはずすホスファターゼを抑制するオカダ酸を細胞に処置しても、抑制反応は修飾されず、AキナーゼやCキナーゼ、Gキナーゼなどのセリン/スレオニン・キナーゼの関与は否定された。一方、カルモジュリンの阻害薬であるcalmidazoliumはヒスタミンによるK_<Ach>チャネル抑制作用を消失させた。カルモジュリンはチロシン残基に結合するリン酸をはずすホスファターゼを活性化することが知られている。したがって、チロシン・キナーゼによるリン酸化でK_<Ach>チャネルが活性化され、H_1受容体刺激はカルモジュリンの活性化させ、これによりチロシン・ホスファターゼがK_<Ach>チャネルを脱リン酸化する経路の存在が強く示唆された。現在、Kチャネルとチロシン・キナーゼの関係をより直接的に明らかにするため、カエル未受精卵に心筋Kチャネルとチロシン・キナーゼの遺伝子を導入してその作用を検討中であるが、cRNAの作成に困難があり、今年度中に結論を得ることはできなかった。

The membrane currents of the isolated cells were measured by the method of "separation and treatment." The activity potential amplitude of H_1 receptor stimulated by H_1 receptor was prolonged, and the activity potential of H_1 receptor stimulated by H_1 receptor <Ach>was inhibited. To investigate the effects of intracellular signaling on the inhibition of K_(2) production<Ach>. The <Ach>inhibitory effect of NCDC on lipid metabolism is related to the inhibition of lipid metabolism. In the presence of 8-br-cGMP, the inhibition of K_<Ach>cGMP production was observed, and the relationship between cGMP/G_cGMP and K_cGMP production was discussed. A, B, C, D, E, E, F, F, The inhibition effect of calmidazolium on cell growth <Ach>was eliminated. The first step in the process of synthesis is to activate the enzyme. The activation of K<Ach>_cell and H_1 receptor stimulated K_cell activation, and the existence of K_cell activation pathway were strongly indicated<Ach>. Now, the relationship between cRNA production and gene transfer is discussed in the middle of this year, and the conclusion is reached.