自然発症てんかんラット海馬錐体細胞異常電流発生機構のパッチクラインプ法による解明

贴片卷曲法阐明自发性癫痫大鼠海马锥体细胞异常电流产生机制

• 批准号: 07670108
• 负责人: 石原 熊寿
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670108/
• 关键词: 自然発症てんかんラット; 海馬; CA3; カルシウムチャネル; 急性単離神経細胞; パッチクランプ; ニカルジピン

てんかん薬の開発のための有用なモデル動物と考えられる自然発症てんかんラット(SER)において、海馬切片を用いた研究で明らかになっているニューロンの異常興奮性についてカルシウムチャンネルの関与を検討した。1.海馬切片を用いた細胞内記録法による検討(1)苔状線維を刺激したときに誘発されるCA3野ニューロンの脱分極シフトと繰り返し発火はL型カルシウムチャネル阻害薬であるジヒドロピリジン系薬物のニカルジピンにより抑制された。(2)ナトリウム及びカリウムチャネル阻害下に記録しているCA3ニューロンに脱分極パルスを細胞内通電したときSERのほうが正常Wistarラットよりも持続の長居カルシウムスパイクが誘発された。(3)SER及びWistarラットのカルシウムスパイクに対してニカルジピンは抑制作用を示したが、SERのカルシウムスパイクの方が感受性が高かった。2.急性単離細胞を用いた実験(1)急性単離したCA3野ニューロンはSER、Wistarラットともにホールセルパッチクランプ法に用いることが可能であった。(2)ナトリウム及びカリウム電流を阻害し、電圧固定下にて脱分極パルスを細胞内に与えるとによりカルシウム電流を誘発した。SERのカルシウム電流の方がWistarラットのそれよりも小さい脱分極電位で流れはじめ、脱分極パルスをかけている間の不活性化の程度は少なかった。(3)ニカルジピンはSERのカルシウム電流をほぼ完全に抑制したが、Wistarラットのカルシウム電流に対しては約50%程度の抑制が観察されただけであった。以上の結果からSERの海馬CA3野ニューロンにおいて観察される異常な脱分極シフトはニューロンのカルシウムチャネルのうち特にL型のカルシウムチャネルの活性化閾値の低下とその不活性化の抑制が関与することとニューロンに存在するカルシウムチャネルのうちニカルジピン感受性のチャネルの相対的な割合が増加していることが示された。これらのことからてんかん発作におけるカルシウムチャネルの異常の関与とてんかん発作に対するカルシウムチャネル阻害薬の治療薬としての可能性が示唆された。

The study of abnormal excitability in hippocampus slices and animal studies on natural symptoms (SER) was carried out. 1. Hippocampus slices were prepared by intracellular recording method.(1) Stimulation of mossy line dimension induced by CA3 field polarization inhibited by CA3 field polarization induced by CA3 field polarization inhibited by field polarization induced by field polarization induced by CA3 field polarization induced by field polarization inhibited by field polarization induced by CA3 field polarization induced by field (2)In the case of normal Wistar rats, it is necessary to record CA3, depolarization, intracellular current, and long-term residence. (3) SERs and Wistar's sensitivity to the inhibition effect of SERs and Wistar's drugs is high. 2. The acute isolation cell is used in the middle of (1) the acute isolation cell is used in the middle of (2) the acute isolation cell is used in the middle of (3) the acute isolation cell is used in the middle of (4) the acute isolation cell is used in the middle of (5) the acute isolation (2)The current in the cell is induced by the current in the cell. The method of SER's current is to reduce the degree of deactivation between the two electrodes. (3)The current of the Wistar is completely suppressed by about 50%. The above results show that the abnormal depolarization of the hippocampus CA3 field is observed in the middle of the brain, and the activity threshold of the L-type hippocampus CA3 field is lowered, and the inactivation inhibition is related to the existence of the abnormal depolarization of the hippocampus CA3 field. The possibility of treatment for this disease is demonstrated by the abnormal relationship between the disease and the disease.

项目成果

T. Momiyama: "Effect of nicardipine on abnormal excitability of CA3 pyramidal cells in hippocampal slices of spontaneously epileptic rats." European Journal of Pharmacology. 280. 119-123 (1995)

T. Momiyama：“尼卡地平对自发性癫痫大鼠海马切片 CA3 锥体细胞异常兴奋性的影响。”