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海馬CA1,CA3間で大きな発現量の違いを示す分子のクローニング

海馬CA1,CA3間で大きな発現量の違いを示す分子のクローニング
海马 CA1 和 CA3 表达水平差异较大的分子克隆
批准号：
08680813
负责人：
玉巻 伸章
金额：
$1.47万
依托单位：
福井医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680813/
关键词：
クローニングDifferencial display海馬CA1CA3

项目摘要

项目成果

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二領域からそれぞれtotalRNAを抽出し、3'末端をPCRにより増幅して、ゲル上で一方の領域に特有なcDNAをクローニングするDifferencial Displayという方法は既に確立したものであるが、興味ある分子を発現できるかどうかは、最初にどの様な差を検出しようとするかによって決まる。海馬の各領域は、特徴的な神経細胞によって構成されており、各々の領域を脳切片より別々に切り出すことが可能である。本研究では、ラット海馬を CA1+海馬台 と CA3+歯状回に切り分けて、各領域からそれぞれtotalRNAを抽出し、3'末端をPCRにより増幅してゲル上で一方の領域に特有なcDNAをクローニングを試みた。その結果、得られた数クローンのcDNA断片より、mRNA分子の発現領域と時期を知るために、イオウのRI標識の入ったcRNAを作り、出生後直後の脳でin situハイブリダイゼーションを行った。その内の一つのクローン(CA1T10α)は、海馬ではCA1領域に特異的に発現しており、DNA配列を調べた結果、未知の分子であることが確かめられた。クローン(CA1T10α)の構造機能解析のために、残されたcDNAの全配列を調べ留努力の結果2kbpまでの塩基配列を決定することができた。ノーザンブロットの結果からmRNAの全長は4.1kbpのと見積もられているので、約半分までは調べられたことになる。これまでのところ、塩基配列から類似遺伝子は見つかっていない。in situ hybridization結果からは、CA1T10αは海馬CA1海馬台、それに続いて新皮質の第5層の神経細胞が発現していることが分かった。
期刊论文(0)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Fujimori,K.E.et al.: "A procedure for in situ hybridization combined with retorgrade labeling of neurons : Application to the study of cell adhesion molecule expression in DiI-labeled rat pyramidal neurons." J.Histochem.Cytochem.(in press).
Fujimori,K.E.等人：“原位杂交与神经元逆行标记相结合的程序：应用于研究 DiI 标记的大鼠锥体神经元中的细胞粘附分子表达。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tamamaki,N.: "Organization of the entorhinal projection to the rat dentate gyrus revealed by DiI anterograde labeling" Exp.Brain Res.(in press).
Tamamaki,N.：“通过 DiI 顺行标记揭示的大鼠齿状回内嗅投射的组织”Exp.Brain Res.（正在出版）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tamamaki,N.et al.: "Intermediate zone and intermediate zone neurons : Do IZ neurons pioneer the layer V neurons in rats?." Developmental Neuroscience. 19. 112-116. ((1997))
Tamamaki,N.等人：“中间区和中间区神经元：IZ 神经元是否是大鼠中 V 层神经元的先驱？”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
遺伝子改変マウスを使用した大脳新皮質投射型GABA神経細胞の役割に関する研究
  • 批准号：
    19650085
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.11万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    玉巻 伸章
  • 依托单位：
    Kumamoto University
大脳皮質神経細胞多様性出現のメカニズムをショウジョウバエに学ぶ
  • 批准号：
    18021030
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $4.99万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    玉巻 伸章
  • 依托单位：
    Kumamoto University
神経細胞産生を調節する神経細胞と非神経細胞間のクロストーク
  • 批准号：
    16047218
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $4.74万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    玉巻 伸章
  • 依托单位：
    Kumamoto University
大脳皮質実質内の存在する神経細胞前駆細胞の様態の観察と培養条件の確立
  • 批准号：
    16015260
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.84万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    玉巻 伸章
  • 依托单位：
    Kumamoto University