抗原提示樹状細胞の機能修飾による免疫誘導療法

通过抗原呈递树突状细胞的功能修饰进行免疫诱导治疗

• 批准号: 07670386
• 负责人: 濱田 洋文
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670386/
• 关键词: 抗原提示; 樹状細胞; T細胞活性化; CD82; モノクローナル抗体; 発現クローニング; 腫瘍ワクチン

当研究では、抗原提示細胞の機能修飾による免疫誘導療法を開発することを目的とする。本年度はその基礎となる抗原提示とTリンパ球活性化のメカニズムの解析を行ってきた。a) GM-CSFプラスIL-4腫瘍ワクチン療法の作用標的として、私たちは抗原提示細胞、特に樹状細胞を考えている。当研究では、GM-CSF産生腫瘍を接種した担癌マウスの脾臓から、樹状細胞を分離培養する方法を開発し、樹状細胞によって細胞性の腫瘍特異抗原が効果的に提示されることが示された。樹状細胞はマクロファージ系の細胞と協調して、非常に強力なT細胞活性化を行う。本研究ではこの現象を試験管内の簡単なアッセイ系で見られるようにし(constimulation assay)、樹状細胞に発現する未知のT細胞活性化共刺激分子ならびにT細胞側のレセプターの分子クローニングを目的として基礎研究を行った。方法としては、樹状細胞によるT細胞活性化を指標として、抗原提示機能を修飾するモノクローナル抗体を作成し、これをプローブとしてCOS7細胞を用いた発現クローニングを行うこととした。現在までに約200クローンのモノクローナル抗体を得ている。T細胞共刺激分子としてB7(CD80とCD86)が代表的であり、よく研究されている。しかし、本研究の腫瘍ワクチン実験の結果では、CD80、CD86ともに充分な抗腫瘍免疫の誘導が得られなかった。また、私たちの樹立したモノクローナル抗体は大多数がB7/CD28系の分子を抗原としているものではなかった。私たちはB7/CD28系の分子以外に、必須な共刺激分子が存在することを想定して、抗体を用いた発現クローニングを進めている。b) そのうちの1つのクローニン(53H5)は、発現クローニングの結果、CD82を抗原として認識することがわかった。CD82はCD9,37,63,81などと共にTM4スーパーファミリーに属し、TCR・抗原レセプター・Fcレセプターなどと会合する分子として知られている。今後、得られた全長cDNAと抗体を用いて詳しい解析を行う予定である。

When studying で で, antigen-indicated cell <s:1> function modification による, immunoinduction therapy を develops する とする とを purpose とする. This year は そ の based と な る antigen prompt と T リ ン パ ball activeness の メ カ ニ ズ ム の parsing line を っ て き た. A) gm-csf プ ラ ス IL - 4 swollen sores ワ ク チ ン therapies の mark と し て, private た ち は tip cell antigen, に dendritic cells を exam え て い る. When the で は and gm-csf swollen sores を vaccination し た bear carcinoma マ ウ ス の splenic か ら, dendritic cells cultivation を す る method を open 発 し, dendritic cells に よ っ て cell sex is の is swollen sores specific antigen が unseen fruit に suggest さ れ る こ と が shown さ れ た. Dendritic cells are <s:1> ジ ロファ ロファ ジ ジ coordinate <s:1> て and very に potent なT cell activation を row う. This study で は こ の phenomenon を test tube の Jane 単 な ア ッ セ イ wearing で ら れ る よ う に し (constimulation assay), dendritic cells に 発 now す る unknown の T cell activation were stimulating molecules な ら び に T cells side の レ セ プ タ ー の molecular ク ロ ー ニ ン グ を purpose と し て basic research line を っ た. Methods と し て は, dendritic cells に よ る T cell activation を index と し て, antigen prompt function を modified す る モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody を し, consummate こ れ を プ ロ ー ブ と し て COS7 cells を using い た 発 now ク ロ ー ニ ン グ を line う こ と と し た. The current までに is about 200 ロ ロ ロ <e:1> モノ モノ ロ ナ ナ を antibodies を て ロ る る. The co-stimulatory molecule of T cells, と, て, B7(CD80, と, CD86)が, represents であ されて and よく research されて であ る る る る る. し か し, this study の is swollen sores ワ ク チ ン be 験 の results で は, CD80, CD86 と も に fully な swollen sores immune の inducing が have ら れ な か っ た. ま た, private た ち の set し た モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody は most が B7 / CD28 molecular を antigen is の と し て い る も の で は な か っ た. Private た ち は B7 / CD28 の に, must な stimulation outside molecules exist が す る こ と を scenarios し て, antibody を い た 発 now ク ロ ー ニ ン グ を into め て い る. B) そ の う ち の 1 つ の ク ロ ー ニ ン (53 h5) は, 発 now ク ロ ー ニ ン グ の results, CD82 を antigen と し て know す る こ と が わ か っ た. CD82 は CD9, 37,63,81 な ど と altogether に TM4 ス ー パ ー フ ァ ミ リ ー に genus し, which is the antigen レ セ プ タ ー, Fc レ セ プ タ ー な ど meet と す る molecular と し て know ら れ て い る. In the future, the られた full-length cDNAと antibody を was obtained and the を line う was determined and である was analyzed in detail by <s:1> て and <s:1> analysis.

项目成果

Abe,J.,et al: "Cytokine gene-modified tumor vaccination intensified by a streptotoccal preparation OK-432." Cancer Immunol.Immunother.41. 82-86 (1995)

Abe, J., 等人：“通过链球菌制剂 OK-432 强化细胞因子基因修饰的肿瘤疫苗接种。”

Lan,K.-H.,et al.: "Gene therapy for carcinoembryonic antigen-producing human gastric cancer cells by adenovirus-mediated expression of ...." Cancer Research. (in press).

Lan,K.-H.等人：“通过腺病毒介导的表达对产生癌胚抗原的人胃癌细胞进行基因治疗......”癌症研究。

Yamaguchi,S.,et al.: "Enhancement of retrovirus-mediated gene transduction efficiency by transient overexpression of the amphotropic receptor,GLVR2." Nucleic Acids Res.23. 2080-2081 (1995)

Yamaguchi,S.,et al.：“通过双嗜性受体 GLVR2 的瞬时过表达增强逆转录病毒介导的基因转导效率。”

Abe,J.,et al.: "Enhanced antitumor effect by adoptive transfer of cytotoxic T lymphocytes producing interleukin-10 by adenovirus-mediated..." Chi,J.Cancer Biother.(in press).

Abe,J.,et al.：“通过腺病毒介导的产生白细胞介素 10 的细胞毒性 T 淋巴细胞过继转移增强抗肿瘤效果……”Chi,J.Cancer Biother.（出版中）。

Abe,J.,et al.: "In vivo antitumor effect of cytotoxic T lymphocytes engineered to produce interferon-α by adenovirus-mediated genetic tranduc..." Biochem.Biophys.Res.Commun.218. 164-170 (1996)

Abe，J.，等人：“通过腺病毒介导的遗传转导改造细胞毒性 T 淋巴细胞的体内抗肿瘤作用......”Biochem.Biophys.Res.Commun.218（1996）。