腫瘍の特異的標的化を目指した遺伝子治療法の開発

开发针对特定肿瘤靶向的基因治疗方法

• 批准号: 06283227
• 负责人: 濱田 洋文
• 金额: $ 56.32万
• 依托单位: Sapporo Medical University (1999)Japanese Foundation For Cancer Research (1994-1998)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06283227/
• 关键词: adenoviral vector; cancer gene therapy; fiber mutant; integrin; melanoma; melanocyte stimutating hormone; malignant melanoma; gastrin releasing peptide; 遺伝子治療; アデノウイルスベクター; 腫瘍抑制遺伝子; 悪性神経膠腫; 脳腫瘍; 悪性黒色腫; EIA; p53; 免疫制御; T細胞活性化; アポトーシス; ファ

当研究では、細胞側の受容体分子との吸着を担うファイバータンパクに変異を導入することによって、癌細胞の標的化が可能な変異アデノウイルスベクター、Adv-F/K20、Adv-F/MSH、Adv-F/GRP、Adv-F/RGD、Adv-F40Sなどを作成した。ファイバーに20個のリジンを付加したF/K20変異型は、ヒト脳腫瘍の対して従来型に比べて数十倍高い遺伝子導入効率が得られ、動物実験でも著明な治療効果増強を示した。これをp53プラスp33ING1によるアポトーシス誘導治療に応用したり、腫瘍特異的な制限増幅型のベクターと組み合わせて、グリオーマに高い治療効果が得られることを報告し、脳外科のグループと協力して、F/K20を用いた臨床研究を準備している。悪性黒色腫、口腔癌などでは、アデノウイルスの受容体CARの発現がきわめて低く、従来型のアデノウイルスベクターでは遺伝子導入効率が非常に低い。これに対し、メラノサイト刺激ホルモン(MSH)を融合させたF/MSH変異ウイルスは、ヒト悪性黒色腫に従来型よりも十倍程度高い遺伝子導入効率を示した。ガストリン放出ペプチド(GRP)を融合させたF/GRP変異ウイルスは、GRP受容体を高発現するヒト前立腺癌などに高い遺伝子導入効率を示した。一方、インテグリンを標的としたRGDモチーフをファイバーのHIループに含むF/RGDウイルスを用いると、悪性黒色腫、口腔の扁平上皮癌などに従来型に比べて数十倍高い遺伝子導入効率が得られることがわかり、臨床への応用が有望である。また、通常用いられるヒト5型アデノウイルス(Ad5)のファイバーのみを40型の短ファイバーに置き換えたAdv-F40Sベクターは、Ad5のファイバーの受容体CARと結合しない。現在、Adv-F40Sベクターをベースとして各種のリガンドとの組み合わせによって、宿主細胞域の狭まった特異性の高い「がん標的化ウイルスベクター」の作成を目指している。

When studying the adsorption of receptor molecules on the cell side and the introduction of different molecules, the standardization of cancer cells may be possible to create different molecules, such as Adv-F/K20, Adv-F/MSH, Adv-F/GRP, Adv-F/RGD, Adv-F40S. The F/K20 gene transfer rate was tens of times higher than that of the original gene transfer rate, and the effect of the gene transfer was enhanced in animals. For example, if you want to use a combination of different types of therapy, you can use a combination of different types of therapy to prepare for clinical studies. The occurrence of CAR in patients with malignant melanoma and oral cancer is very low. In this case, the F/MSH ratio is 10 times higher than that of the MSH ratio. A high percentage of GRP receptors are found in the early stages of development. The rate of gene introduction is tens of times higher than that of oral squamous cell carcinoma. It is expected to be used in clinic. In general, Ad5 is used for the combination of Ad5 and Ad40 receptor CAR. Now, Adv-F40S can be used to create a variety of different combinations of host cell domains with high specificity.

项目成果

Abe,J.et al.: "Adoptive immunotherapy with cytokine-gene-modified cytotoxic T lymphocytes." Proc.Int.Symp.Bone Marrow Transpl.,Verlag,Tokyo. (in press).

Abe, J. 等人：“使用细胞因子基因修饰的细胞毒性 T 淋巴细胞进行过继免疫治疗。”

Hanada,K.et al.: "Strategies for immunogene therapy against cancer." Proc.Nagoya Int.Symp.Cancer Chemother.9. 73-80 (1994)

Hanada,K.等人：“针对癌症的免疫基因治疗策略。”

Shibagaki,N., Hanada,K., Yamaguchi,S., Yamashita,H., Shimada,S. and Hamada,H.: "Functional analysis of CD82 in the early phase of T cell activation:roles in cell adhesion and signal transduction." Eur.J.Immunol. (in press). (1998)

柴垣，N.，花田，K.，山口，S.，山下，H.，岛田，S.

Yoshida,Y., Sadata,A., Zhang,W., Shinoura,N., and Hamada,H.: "Generation of fiber-mutant recombinant adenoviruses for gene therapy of malignant glioma." Human Gene Therapy. 9(17). 2503-2515 (1998)

Yoshida,Y.、Sadata,A.、Zhang,W.、Shioura,N. 和 Hamada,H.：“用于恶性神经胶质瘤基因治疗的纤维突变重组腺病毒的生成。”

Zhang,W., He L., Yuan Z., Xie Z., Wang,J., Hamada,H., and Cao X.: "Enhanced therapeutic efficacy of tumor RNA-pulsed dendritic cells after-genetic modification with lymphotactin." Human Gene Therapy. 10(7)in press. (1999)

张 W.、何 L.、袁 Z.、谢 Z.、王 J.、滨田 H. 和曹 X.：“用淋巴趋化素进行基因修饰后肿瘤 RNA 脉冲树突状细胞的治疗效果增强。