リピドーシス動物モデルを用いての中枢神経障害の遺伝子治療

使用脂质沉积动物模型治疗中枢神经系统疾病的基因疗法

• 批准号: 07670902
• 负责人: 衛藤 義勝
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670902/
• 关键词: リピドーシス; クラッベ病マウス; ニーマンピック病マウス; アデノウイルスベクター; ヘルペスウイルスベクター; SV-40; CMVpromotor; RSV

リピドーシス患者の中枢神経障書の治療法を開発するため、本研究では最近HINで開発されたゴ-シェ病マウス、或いは従来我々が研究してきたクラッベ病マウス(Twitcher mice)、ニーマンビックマウスなどの動物モデルマウスを用いて、アデノウイルスベクター或いはヘルペスウイルスベクターに障害遺伝子のcDNAを組み込み脳内或いは髄中内に挿入し、脳障害の細胞内修復の臨床的、生化学的検討並びに遺伝子の発現に関して検討している。その際、各々のベクターでのプロモタ-領域を種々改良を加え、神経系組織或いは細胞への発現性を高める。神経親和性のあるヘルペス、アデノウイルスベクターの効率を比較検討をすると同時に遺伝子発現の持続期間、細胞内酵素動態を検討し、実際でのヒト遺伝子治療での基本的問題点に関して明らかにし、またカルシウム代謝を合めたリピドーシスマウスでの細胞内情報伝達機構の修復の機構も合わせて検討している。1)中枢神経親和性のベクターの開発:アデノウイルス或いはヘルペスウイルスのベクターのプロモタ-領域にSV-40、CMVpromotor、RSVなどの各種プロモタ-をベクター内に組み替えマウス培養神経細胞又はオリゴデンドログリア細胞内で発現させ効率を明らかにした。2)中枢神経障害の遺伝子治療:ゴ-シェ病マウス、クラッベ病マウス(Twitcher mice)、への脳内又は髄中内にアデノウイルスベクター或いはヘルペスウイルスベクターに各々ヒトglucocerebrosidase cDNA、arylsulfatase A cDNAを組み込む。ヘルペスウイルスの場合はプロモタ-として、gCプロモーターとSV-40のpolyadenylation signalを用いた。またアデノウイルスの場合はSV-40のearly promotor領域とhuman T-cell leukemia virusの5′側上流のnon-coding領域をプロモタ-として用いており、SR-alphaを言うアデノウイルスベクターを使用した。更にゴ-シェ病マウス脳において、形態並びに生化学的な蓄積の改善、細胞障害の改善の機構のプロセスが明らかになりつつある。よって、リピドーシスマウスの脳内細胞内でのカルシウム代謝の改善度を明らかにすることにより中枢神経の遺伝子治療効果を解明することを目指し研究を更に進めている。

The treatment of central nervous system disorders was developed recently in this study.(Twitcher mice), In addition, the development of nervous system tissues or cells is enhanced. A comparative study of the efficiency of cell affinity, the duration of gene production, the dynamics of intracellular enzymes, and the fundamental problems associated with cell affinity therapy are discussed. 1)Development of central nervous system affinity: SV-40, CMV promoter, RSV, and various other receptor types in the field of neurogenesis, and the efficiency of intracellular production in cultured neurons. 2)Gene therapy for central nervous system disorders: Twitcher mice, Twitcher mice, Twit The polyadenylation signal of SV-40 is used in the field combination of SV-40. The field combination of SV-40's early promoter domain and human T-cell leukemia virus's 5′ upstream non-coding domain can be used in the middle and SR-alpha fields. In addition, there are changes in morphology and biochemistry, and changes in the mechanism of cellular damage. To clarify the effects of gene therapy in central nervous system

项目成果

Ohashi T., Eto Y., et al.: "Successful transduction of Oligodendrocytes and restoration of Arylsulfatase A deficiency in metachromatic luekodystrophy fibroblasts using an adenovirus vector." Gene Therapy. 2. 443-449 (1995)

Ohashi T.、Eto Y. 等人：“使用腺病毒载体成功转导少突胶质细胞并修复异染性脑白质营养不良成纤维细胞中的芳基硫酸酯酶 A 缺陷。”

御藤義勝: "特集"遺伝子治療"リソドーム病の遺伝子治療" 医学のあゆみ, 642-645(4) (1995)

Yoshikatsu Mito：“专题”基因治疗“溶酶体疾病的基因治疗”医学史，642-645(4) (1995)

Ida H., Eto Y., et al.: "Characteristics od gene mutations among 32 unrelated Japanese Gaucher disease patients: absence of the common Jewish 84GG and 1226G mutations." Human Genetics. 95. 717-720 (1995)

Ida H.、Eto Y. 等人：“32 名无关的日本戈谢病患者的 od 基因突变特征：不存在常见的犹太 84GG 和 1226G 突变。”

Ida H., Eto Y., et al.: "Identification of three novel mutation in the acid sphingomyelinase gene of Japanese patients with Niemann-Pick disease type A and B." Human Mutation. 7. 65-67 (1996)

Ida H.、Eto Y. 等人：“日本 A 型和 B 型尼曼匹克病患者酸性鞘磷脂酶基因中三种新突变的鉴定。”

Ohashi T., Eto Y., et al.: "Overexpression of arylsulfatase A gene in tibroblasts from metachromatic leukodystrophy patients dose not induce a new phenotype." Gene Therapy. 2. 1-6 (1995)

Ohashi T.、Eto Y. 等人：“异染性脑白质营养不良患者的成纤维细胞中芳基硫酸酯酶 A 基因的过度表达不会诱导新的表型。”