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ヒト肥満成因としてのβ_3アドレナリン受容体の意義解明に関する研究

β_3肾上腺素受体作为人类肥胖原因的意义研究

基本信息

批准号：
07671149
负责人：
吉田俊秀
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至 1996
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671149/
关键词：
肥満 β_3受容体 β_3受容体mRNA β_3受容体蛋白白色脂肪細胞胆嚢内皮細胞

项目摘要

我々は現在までにヒト術中摘出白色脂肪標本を用い、健常成人では脂肪細胞にβ_3受容体が存在する事をβ_3受容体c-DNAプローベを用いるノザンブロット法にて確認し、しかも量的には腸間膜=後腹膜>皮下脂肪組織の順に多くβ_3受容体m-RNAが存在する事を報告してきた。しかし、肥満者ではその15.4%(2/13)にβ_3受容体m-RNAの発現の極端に弱い例が存在した。この事はβ_3受容体の減少は肥満原因になりうる事を示す発見と考えられた。しかし、この結果はすべてpolymerase chain reactionにて増幅後の測定結果であった為、定量的に意義に関しては相対的な価値しかない。そこで今年度はこの問題点を解決し、肥満成因としてのβ_3受容体の意義を明確にする為、ウエスタンブロット法を用いβ_3受容体蛋白レベルの定量化を試みた。その結果、ニュージーランドウサギを用いて今回作製した2種類のβ_3受容体抗体(β_3受容体のN末端合成フラグメントとC末端合成フラグメントを用いて作製)を用いてヒト胆嚢内皮細胞とヒト白色脂肪細胞を染色すると、両抗体ともに両組織にて染色可能であった。しかし、今回作製した抗体はどちらも抗体価が低くウエスタンブロット法にて両組織を検討してみたが、β_3受容体蛋白は検出不能であった。そこで現在更に抗体価の高い抗体を作製する為、前述のβ_3受容体のN末端合成フラグメントとC末端合成フラグメントを用いて再作製を試みるともに、他の部位を認識するβ_3受容体合成フラグメントを用いても抗体を作製中である。今後これらの抗体が作製されしだい、ヒト白色脂肪細胞にてβ_3受容体蛋白の検出を試みる予定にしている。

We report the presence of β_3 receptor c-DNA in adipocytes in healthy adults and the presence of β_3 receptor m-RNA in subcutaneous fat. 15.4%(2/13) of β_3 receptor m-RNA were found in the most common cases. The reason for the decrease of β_3 receptor in this matter is shown in the paper. The results of the measurement are related to the quantitative significance of the polymerase chain reaction This paper attempts to solve the problem of β_3 receptor protein in this year, clarify the cause and significance of β_3 receptor protein, and try to quantify β_3 receptor protein by using the method of protein synthesis. The results showed that the antibody against β_3 receptor (N-terminal synthesis of β_3 receptor and C-terminal synthesis of β_3 receptor) could be used to stain endothelial cells and white adipose cells. Antibodies were detected in the tissue and β_3 receptor proteins. In addition, the N-terminal synthesis and C-terminal synthesis of the β_3 receptor were studied in order to understand the position of the β_3 receptor. In the future, the production of β_3 receptor protein in white adipose cells will be studied in the future.