生理活性ペプチドプロセシングプロテアーゼ・PACE4の機能

生物活性肽加工蛋白酶PACE4的功能

• 批准号: 07680689
• 负责人: 辻 明彦
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680689/
• 关键词: ペプチドホルモン; プロセシング; プロテアーゼ; プロホルモンコンベルターゼ; PACE4; ケキシン様プロテアーゼ; 塩基アミノ酸対; 生理活性ペプチド

PACE4は,cDNAクローニングにより同定されたプロホルモンプロセシングプロテアーゼの1つであるが,その生理機能についてはまだ殆ど明らかにされていない。我々は,PACE4には複数のアイソフォームが存在することをcDNAクローニングにより証明したが,本研究はPACE4アイソフォーム(4A,4C,4D,4E)の細胞特異発現及び機能分担を解明するためその遺伝子構造,アイソフォームの発現機構,アイソフォームの基質特異性,ISH及び免疫染色法による細胞特異発現について研究を行った。まず,ヒトゲノムDNAライブラリーよりヒトPACE4遺伝子をクローニングし,そのゲノム構造を解明した。ヒトPACE4遺伝子は,150kb以上の長さで,同一遺伝子内にPACE4アイソフォーム共通ドメイン及びアイソフォーム特異ドメインをコードするエクソンが存在し,選択的スプライシングにより種々のアイソフォームが生じることが判明した。フォンフィブランドファクター,補体C3,レニンとの共発現により各アイソフォームの基質特異性について検討した結果,少なくとも,PACE4A,4C,4Eは活性を有するが,幾分その基質特異性に差が認められた。また細胞組織分布は,PACE4Aは下垂体に,4Cは膵β細胞に,4Eは嗅球に特に強く発現していた。以上の結果,PAE4アイソフォームは,細胞特異的なスプライシングにより発現し,各々のアイソフォームが異なる細胞で種々の活性ペプチドのプロセンシングを介して細胞の分化,増殖,代謝調節に関与していると考えられた。

PACE4是通过cDNA克隆确定的激素加工蛋白酶之一，但其生理功能尚未揭示。我们证明了通过cDNA克隆中存在多种同工型，在这项研究中，我们研究了基因结构，同工型表达的机理，同工型的底物特异性，ISH和细胞特异性表达，以阐明PACE4同工型的细胞特异性表达（4A，4C，4C，4D，4D，4D，4E）。首先，将人PACE4基因从人的基因组DNA文库中克隆，并阐明了其基因组结构。人PACE4基因的长度为150 kb或更多，编码PACE4同工型公共域和同工型特异性结构域的外显子在同一基因内发现，替代剪接产生各种同工型。通过与fonfibrand因子，补体C3和肾素共表达每个同工型的底物特异性，尽管PACE4A，4C，4E是活性的，但底物的底物特异性略有差异。此外，细胞组织分布在垂体中的PACE4A中特别强烈表达，胰腺β细胞中的4C和嗅球中的4E。结果，人们认为Pae4同工型通过细胞特异性剪接表达，并且每个同工型都通过在不同细胞中的各种活性肽的生动来调节细胞分化，增殖和代谢调节。