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翻訳終結因子eRF3のプロセシング異常がもたらす新しい癌発症メカニズム

翻译终止因子eRF3异常加工带来的新的癌症发生机制

基本信息

批准号：
19K07086
负责人：
細田直
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒト翻訳終結因子eRF3のN末端には、GGCトリプレットリピートによってコードされるグリシンリッチ領域が存在する。申請者らは、この領域がプロテアーゼにより切断されることを見出した。切断により露出したN末端配列にはアポトーシス阻害因子IAPが結合し、アポトーシスが制御されることを明らかにした。興味深いことに、正常ではこのリピート数が10もしくは11であるのに対し、12以上になると乳癌および胃癌発症率が増大することが、遺伝子多型解析により示されている。本研究では、eRF3のもつグリシンリッチ領域のプロセシング異常が癌発症を増大させる分子メカニズムの解明を試みた。まず、eRF3発現抑制時におけるリボソームの動態をリボソームプロファイリング法により解析した。その結果、eRF3発現抑制時において、翻訳終結反応異常により引き起こされるリボソームの終止コドン近傍における停滞、および終止コドンのリードスルーがゲノムワイドに生じており、eRF3が翻訳終結に機能することが確認された。このときのmRNA動態を解析したところポリA鎖の分解促進が認められた。eRF3は翻訳終結因子として機能するとともに、ポリA鎖分解を抑制することでmRNA分解における律速段階となるポリA鎖分解の速度を適切に保つ機能を担うことが明らかとなった。さらにトリプレットリピートが0-20となる複数のeRF3発現ベクターを作製し、これら一過的過剰発現が上記機能に与える効果について検証した。リピート12のeRF3発現によりこの機能が減弱する傾向は認められたものの、有意な差は得られなかった。そこでeRF3のもつプリオン性を考慮し持続的なeRF3発現がその効果に必須と予想し、CRSPR-Cas9系をもちい各種リピート数をもつeRF3の安定発現細胞株の作製を試みた。

Termination factor eRF3 N-terminal, GGC Terminatorリピートによってコードされるグリシンリッチ地がexistentする. The applicant's field is open to the public. Cut off the N-terminal arrangement of the により and reveal the にはアポトーシス blocking factor IAP and the binding し, and the アポトーシスがcontrol the されることを明らかにした. The interest is deep, the normal number is 10, the number is 10, the number is 11, and the number is 12 or more Breast cancer, gastric cancer, and the incidence rate of cancer are increasing, and polytype analysis of breast cancer and gastric cancer has been shown. This research is conducted in the field of eRF3グAbnormal cancer disease を Increased size させるmolecules メカニズムの解明をtrialみた.まず, eRF3 appears to be inhibited when the におけるリボソームのdynamic をリボソームプロファイリング法によりanalytic した.その results, eRF3 appears to be inhibited when the reaction is suppressed, and the abnormal reaction is reversed at the end of the translation. Stagnation, cessation of cessation of lifeじており, eRF3 が訳Endに function することがconfirmed された.このときのmRNA dynamic analysis したところポリA lock のlysis promotion がcognition められた. The functions of eRF3 translation terminator and するとともに, and the decomposition of ポリA lock are inhibited and the mRNA secretion is The speed of the solution is the speed and speed of the lock.さらにトリプレットリピートが0-20となるpluralのeRF3発 appearベクターThe functions and effects listed above are all shown in the process of production and production.リピート12のeRF3発appears that the function is weakened, the tendency is recognized, and the difference is intentional.そこでeRF3のもつプリオンをConsidering the effect of なeRF3 that holds the key, it is necessary to think about it, C The RSPR-Cas9 system is based on the production and testing of various human-derived eRF3 stable cell lines.