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カルシウムシグナルの発生と伝達に関する分子細胞生物学的研究

钙信号产生和传递的分子细胞生物学研究

基本信息

批准号：
07680785
负责人：
飯田秀利
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、性フェロモンによるカルシウムシグナルの発生と受容伝達の分子機構を明らかにすることである。前年度までに、Ca^<2+>の流入に欠損を持つmid1変異株、およびCa^<2+>シグナルの受容または伝達に欠損をもつと予想されるmid2変異株とmid5変異株の分子遺伝学的解析を行った。本年度は、mid2変異株とmid5変異株に関してさらに研究を深め、次の研究成果を得た。まず、MID2遺伝子はCa^<2+>結合領域と予想される領域を含むタンパク質をコードするが、この領域が実際Ca^<2+>を結合することをステインズ・オールを用いた分光学的方法で明らかにした。さらに、この領域が細胞内で機能しているかどうかを、その領域にアミノ酸置換を導入するin vitro mutagenesis法で調べた。その結果、アミノ酸置換を受けた変異Mid2タンパク質はCa^<2+>結合能が低くなり、それを発現している変異株はmid2変異株と似た表現型を示すことを明らかにした。これらの結果は、Mid2タンパク質がカルシウムシグナルの受容伝達に重要であることを示唆している。一方、MID5遺伝子は、PKC1→BCK1→MKK1&2→MPK1→RLM1というMAPキナーゼカスケードを構成するBCK1遺伝子と同一であることを昨年度明らかにしている。このカスケードは、細胞の対数増殖期ではたらくことが既に証明されているが、性フェロモンによるシグナルの伝達経路ではたらいているか否かは不明であった。今回、分子遺伝学的に解析した結果、PKC1→BCK1→MKK1&2→MPK1までは性フェロモンのシグナル伝達が伝達されるが、RLM1にはほとんど伝わらないことを明らかにした。この結果は、性フェロモンのシグナル伝達経路ではMPK1(=MAPキナーゼ)の下流にはRLM1とは別のタンパク質が機能していることを示唆している。

The aim of this study is to clarify the molecular mechanisms of development and receptor expression in human beings. In the previous year, Ca^<2+> and Ca^<2 +> inflow were deficient in mid1 variant, Ca^<2+> and Ca ^<2 +> were deficient in tolerance. This year, the research results of two different plants and five different plants have been obtained. In addition, the MID2 gene Ca^<2+> is combined with the field to be expected, and the field is combined with the field Ca^<2+>. In addition, in the field of intracellular function, the introduction of acid substitution in vitro mutagenesis is regulated. The results of acid substitution are different from those of Ca^<2+>. The results of this study are as follows: 1. One side, MID5 carrier, PKC1→BCK1→MKK1&2→MPK1→RLM1 → MAP The number of cells in the cell is unknown. Now, the molecular genetics analysis results, PKC1→BCK1→MKK1&2→MPK1, RLM1, RLM 2, RLM 3, RLM 3, RLM 4, RLM 4, RLM 5, RLM 6, RLM 7, RLM 3, RLM 4, RLM 3, RLM 4, RLM 4, RLM 3, RLM 4, RLM 4, RLM 5, RLM 3, RLM 4, RLM 3, RLM 4, RLM 4, RLM 5, RLM 4, RLM 3, RLM 4, RLM 3, RLM 4, RLM 4 The result of this is that MPK1 (=MAP) and RLM1 (=MAP) are the downstream components of MPK1 (=MAP) and RLM1 (= MAP).