硬組織におけるカルシウム代謝の微細構造的研究

硬组织钙代谢的超微结构研究

基本信息

批准号：
07807001
负责人：
川真田聖一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07807001/
关键词：
カルシウム骨耳石アンチモン脱灰石灰化歯骨化

项目摘要

骨や歯をピロアンチモン酸法で固定し、0.3N塩酸の70%エタノール溶液で脱灰した。この方法による脱灰は急速で、塩化アンモニウム法では効果が無かった歯や成熟動物の骨にも有効であった。包理した試料の薄切は、軟部組織の様に容易であった。脱灰処理した試料の準超薄切片をトルイジンブルーで染めると、軟骨内骨化部位や、歯のエナメル質および象牙質にきれいなメタクロマジ-を呈する部分が観察された。各種細胞の微細構造や染色性も良好であった。電顕では、メタクロマジ-の部分に一致してピロアンチモン酸カルシウムの沈殿が観察され、沈殿の量は以前塩化アンモニウムで脱灰した試料を観察したときとほとんど同じで、塩酸エタノールによる脱灰で失われる沈殿は少量と考えられた。また、沈殿の局在は非脱灰のものと比較して差異は見られなかった。沈殿にカルシウムが含まれているかどうか調べるためにX線微小部分析すると、明瞭にカルシウムが検出され、ピロアンチモン酸と結合したカルシウムだけが選択的に保存されていることが確認された。本研究では、塩酸のエタノール溶液を用いることにより、すべての硬組織において、ピロアンチモン酸とカルシウムの沈殿を残しつつ脱灰できるようになった。現在この方法を使って、1.歯のエナメル質や象牙質形成時におけるカルシウム輸送と石灰化のメカニズム、2.膜内骨化におけるカルシウムイオンの局在、3.軟骨内骨化におけるカルシウムイオンの分布と骨化の機序、などについて追求している。

使用pyroantimonic酸方法固定骨骼和牙齿，并用70％乙醇溶液中的0.3N盐酸脱钙。通过这种方法脱矿化是迅速的，对成熟动物的牙齿和骨骼有效，这是氯化铵方法无效的。切片的铭刻样品和软组织一样容易。当用甲苯胺蓝色染色的半粉状样品的半粉状切片时，我们观察到内侧软骨骨化的区域以及牙齿搪瓷和牙本质的一部分，这些区域表现出美丽的固定数学。各种细胞的精细结构和染色特性也非常出色。在电子显微镜中，观察到与高点部分一致观察到的丙酸钙，并且沉淀量几乎与我们观察到先前用氯化铵脱钙的样品的样品，并且被认为是用乙醇盐酸脱氧化的降水量的量，被认为是盐酸乙醇的量。此外，与非矿物化相比，降水定位没有差异。 X射线微分析以检查沉淀物是否含有钙清楚地显示钙，证实仅钙结合到倍氨酸甲酸。在这项研究中，通过使用盐酸的乙醇溶液，可以将所有硬组织脱矿物，从而降低pyroantimonic酸和钙的沉淀。目前，使用这种方法，我们正在追求1。牙齿搪瓷和牙本质形成期间钙传输和钙化的机制，2。钙离子在膜内骨化中的定位，3。钙离子在内侧骨化中的钙离子分布和骨化机制。