硬組織におけるカルシウム代謝の微細構造的研究

骨や歯をピロアンチモン酸法で固定し、0.3N塩酸の70%エタノール溶液で脱灰した。この方法による脱灰は急速で、塩化アンモニウム法では効果が無かった歯や成熟動物の骨にも有効であった。包理した試料の薄切は、軟部組織の様に容易であった。脱灰処理した試料の準超薄切片をトルイジンブルーで染めると、軟骨内骨化部位や、歯のエナメル質および象牙質にきれいなメタクロマジ-を呈する部分が観察された。各種細胞の微細構造や染色性も良好であった。電顕では、メタクロマジ-の部分に一致してピロアンチモン酸カルシウムの沈殿が観察され、沈殿の量は以前塩化アンモニウムで脱灰した試料を観察したときとほとんど同じで、塩酸エタノールによる脱灰で失われる沈殿は少量と考えられた。また、沈殿の局在は非脱灰のものと比較して差異は見られなかった。沈殿にカルシウムが含まれているかどうか調べるためにX線微小部分析すると、明瞭にカルシウムが検出され、ピロアンチモン酸と結合したカルシウムだけが選択的に保存されていることが確認された。本研究では、塩酸のエタノール溶液を用いることにより、すべての硬組織において、ピロアンチモン酸とカルシウムの沈殿を残しつつ脱灰できるようになった。現在この方法を使って、1.歯のエナメル質や象牙質形成時におけるカルシウム輸送と石灰化のメカニズム、2.膜内骨化におけるカルシウムイオンの局在、3.軟骨内骨化におけるカルシウムイオンの分布と骨化の機序、などについて追求している。

骨や歯をピロアンチモン酸法で固定し、0.3N塩酸の70%エタノール溶液で脱灰した。この方法による脱灰は急速で、塩化アンモニウム法では効果が無かった歯や成熟動物の骨にも有効であった。包理した試料の薄切は、軟部組織の様に容易であった。脱灰処理した試料の準超薄切片をトルイジンブルーで染めると、軟骨内骨化部位や、歯のエナメル質および象牙質にきれいなメタクロマジ-を呈する部分が観察された。各種細胞の微細構造や染色性も良好であった。電顕では、メタクロマジ-の部分に一致してピロアンチモン酸カルシウムの沈殿が観察され、沈殿の量は以前塩化アンモニウムで脱灰した試料を観察したときとほとんど同じで、塩酸エタノールによる脱灰で失われる沈殿は少量と考えられた。また、沈殿の局在は非脱灰のものと比較して差異は見られなかった。沈殿にカルシウムが含まれているかどうか調べるためにX線微小部分析すると、明瞭にカルシウムが検出され、ピロアンチモン酸と結合したカルシウムだけが選択的に保存されていることが確認された。本研究では、塩酸のエタノール溶液を用いることにより、すべての硬組織において、ピロアンチモン酸とカルシウムの沈殿を残しつつ脱灰できるようになった。現在この方法を使って、1.歯のエナメル質や象牙質形成時におけるカルシウム輸送と石灰化のメカニズム、2.膜内骨化におけるカルシウムイオンの局在、3.軟骨内骨化におけるカルシウムイオンの分布と骨化の機序、などについて追求している。