蝸牛組織における一酸化窒素(NO)のイオン分泌制御の研究

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1)In vivo系におけるNO産生機構人工呼吸下にモルモット鼓室階にNO測定電極を挿入し、NOモニター(ポーラログラフィー法、現有設備)にてNOを測定した。外リンパ腔を急速外リンパ灌流装置により灌流して、アゴニストや化学伝達物質(ATP、バゾプレシン)を投与し、NOの変化を測定した。2)In vitro系におけるNO産生機構モルモットより摘出した血管条に、アゴニストや化学伝達物質(ATP、バゾプレシン)を投与し、NOモニターを用い、NOの濃度の上昇を認めた。またNOS阻害剤であるL-NMMAを投与し、NO濃度の上昇は抑制された。3)In vitro系におけるNOの蝸牛イオン輸送への影響モルモットより摘出した血管条に、細胞内Ca蛍光色素を負荷した。NO発生試薬であるSNPを投与すると、細胞内Ca濃度が上昇した。4)一酸化窒素合成酵素(NOS)の局在免疫組織学的には、抗Brain NOS抗体、抗Endothelial NOS抗体を用い、モルモットの蝸牛組織の血管条において、抗Endothelial NOS抗体の局在を同定した。