超高感度磁気センサを用いた生体高分子検出法の検討

超灵敏磁传感器生物聚合物检测方法研究

• 批准号: 14655306
• 负责人: 田中 三郎
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Toyohashi University of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14655306/
• 关键词: SQUID; 磁気センサ; DNA; ハイブリダイズ; 生体高分子; ELISA; 凍結

磁性微粒子を用いて標識し、それを超高感度SQUID (Superconducting Quantum Interference Device)磁気センサーを用いて、DNA生体高分子を検出する方法を検討した。これまでに2重螺旋DNAを基板に固定することに成功していたので、今年度は一本鎖DNAをガラス基板上に固定し、実際に相補的な一本鎖DNAをハイブリダイズさせることを検討した。まず、Fe3O4微粒子マーカーを付与した一本鎖サンプルDNAの濃度を変えて5サンプル用意した.次に相補的一本鎖プローブDNAをアルデハイドコートされたガラス基板に固定した。これらをハイブリダイズさせて、未反応のサンプルDNAを洗浄除去後にSQUID磁気センサシステムで信号を計測した。その結果、一定濃度以上のサンプルDNAを加えても信号が増加せず、飽和傾向を示すことがわかった。これによつて、微粒子マーカー付きサンプルDNAとプローブDNAがハイブリダイズしていることを確認することができた。今後、相補的でないネガティブデータの取得、および、温度依存性を検討していく必要がある。今年度得られた成果についてはJJAPレターに既に投稿済みである。

研究了使用超敏感鱿鱼（超导量子干扰装置）磁性传感器标记磁颗粒并检测DNA生物聚合物的方法。由于到目前为止，我们已经能够将双链DNA固定到基板上，因此我们已经考虑将单链DNA固定在今年的玻璃基板上，并实际上杂交了互补的单链DNA。首先，通过不同浓度的单链样品DNA制备了五个样品，将Fe3O4微粒标记物应用于这些样品。接下来，将互补的单链探针DNA固定在醛涂层的玻璃基板上。将它们杂交，并洗涤未反应的样品DNA并去除，并使用鱿鱼磁传感器系统测量信号。结果，发现即使添加了超过一定浓度的样品DNA，信号也不会增加，并且显示出饱和的趋势。这使我们能够确认具有微粒标记和探针DNA的样品DNA被杂交。将来，有必要获取非汇总负面数据并考虑温度依赖性。今年获得的结果已经在JJAP信件中发布。

项目成果

田中三郎, 松田剛昌他: "高温超伝導SQUIDによる磁場中冷却方を用いたイミュノアッセイの提案"静電気学会講演論文集. C2. 335-336 (2002)

Saburo Tanaka、Gosho Matsuda 等人：“在磁场中使用高温超导 SQUID 冷却的免疫测定的提案”日本静电学会会议记录 C2 (2002)。