ヒト大腸全摘術後残存小腸における定量的水分電解質吸収能解析システム確立

人体全结肠切除术后剩余小肠水电解质吸收能力定量分析系统的建立

• 批准号: 14657295
• 负责人: 福島 浩平
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657295/
• 关键词: 大腸全摘; 潰瘍性大腸炎; intestinal adaptation; Ussing chamber; SGLT1; ENaC; 大腸全摘術; intestinal odaptation

1、ヒト生検粘膜組織を用いた電気生理学的検討ヒト生検組織を用いた電気生理学的な検討システムを樹立しえた。ヒト生検組織は、倫理委員会で承認された様式に乗っ取り、インフォームドコンセントのもと潰瘍性大腸炎の初回手術時の回腸末端部、Coveringi ileostomy閉鎖時の回腸粘膜、さらに回腸パウチから採取した。viabilityの指標として、SGLT1によるナトリウムグルコース共輸送系短絡電流の発生を指標とした。現在までのところサンプル数は少ないものの、大腸全摘術後のアミロライド感受性短絡電流の増加や、ループ式回腸瘻の口側(管腔内での食物との接触あり)と肛門側(管腔内での食物との接触なし)ではグルコース投与による短絡電流の増加は(予想に反し)あまり違いがないなどの結果が出ている。2、生検組織を用いた電解質輸送関連分子発現の定量的評価前年度のレーザーカプチャーによるマイクロダイセクション法によるRNA調整の予備的検討に引き続いて、定量的RT-PCRのための条件設定を行った。サンプルは、ヒト大腸手術標本より分離した上皮細胞RNAを用い、アルドステロン関連分子(mineralocorticoid receptor、glucocorticoid receptor、11b-hydroxysteroid dehydrogenase type 2、prostasin、epithelial sodium channel a-、b-、g-subunit)とハウスキーピング遺伝子(b-actin、GAPDH)mRNA定量のためのprimer設定、反応条件などを検討、確立した。3、本プロジェクトの当初の目標であった「ヒト生検組織を用いた定量的電解質輸送能解析のためのシステムの確立」はほぼ達成し得たものと考える。しかし、生検組織を電気生理学的検討に用いるにしても全例うまくいくわけではなく、約半数が生検時の組織損傷やviabilityの低下によって測定に供することができないなど、さらなる工夫が必要である。

1. The development of biological mucosa tissue is based on the development of biological physiology The Ethics Committee recognizes that the ileal mucosa and ileal mucosa at the time of initial operation for ulcerative colitis are the same as those at the time of closure. Viability indicators, SGLT1 indicators, common transport system short-circuit current generation indicators Now, the number of these patients decreases, and the number of receptive short-circuit currents increases after total colectomy, and the number of short-circuit currents increases on the oral side (food contact in the lumen) and anal side (food contact in the lumen) of ileal fistula. 2. Quantitative evaluation of the production of electrolyte transport-related molecules in biological tissues. Preliminary study of RNA regulation in the presence of electrolyte transport-related molecules. The primers for RNA quantification of epithelial cells (mineralocorticoid receptor, glucocorticoid receptor, 11b-hydroxystyroid dehydrogenase type 2, prostaglandin, epithelial sodium channel a-, b-, g-subunit) and B-actin, GAPDH mRNA were set up, and the reverse conditions were discussed and established. 3. The original purpose of this paper is to establish the quantitative electrolyte transport energy analysis of the biological organization. The time required to determine tissue damage and reduced viability is approximately half of the time required for the study of electrophysiology of living tissues.

项目成果

福島浩平, 佐藤俊ほか: "大腸全摘術後残存小腸の適応促進"消化器科. 35巻5号. 523-528 (2002)

Kohei Fukushima，Shun Sato 等人：“促进全结肠切除术后剩余小肠的适应”，胃肠病学，第 35 卷，第 5 期，523-528（2002 年）。

S.Sato, K.Fukushima et al.: "Induction of 11β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 2 and Hyperaldosteronism are Essential for Enhanced Sodium Absorption after Total Colectomy in Rats"Surgery. In press. (2004)

S.Sato、K.Fukushima 等人：“诱导 2 型 11β-羟基类固醇脱氢酶和醛固酮增多症对于大鼠全结肠切除术后钠吸收的增强至关重要”，手术中（2004 年）。

K.Fukushima et al.: "In vivo induction of prostasin mRNA in colonc epithelial cells by dietary sodium depletion and aldosterone infusion in rats"J Gastroenterology. In press. (2004)

K.Fukushima 等人：“通过大鼠膳食钠消耗和醛固酮输注体内诱导结肠上皮细胞中的前列腺素 mRNA”J Gastroenterology。

福島浩平: "大腸全摘術後の適応促進のためのストラテジー"Progress in Medicine. 23巻13号. (2003)

Kohei Fukushima：“促进全结肠切除术后适应的策略”，《医学进展》，第 23 卷，第 13 期（2003 年）。