生体防御機構解析のための組織工学による消化管粘膜の構築

本研究の目的は、tissue engineeringの成果を活用することによりin vivoと従来のin vitroの系をつなぐものとして、多種類の細胞下らなり、3次元構築を維持し液性因子や細胞接着を通じて情報伝達が可能なシステムを作り上げることであった。1,各種バイオマテリアルを用いた多細胞系の確立マウス線維芽細胞株3T3細胞を滅菌したアガロースゲル上での培養を試みたところ、細胞の増殖は抑制されモノレーヤーを形成するに至らなかった。そこで、アガロースの種類や濃度を変え、かつ37度で固形化する条件などを検討したが、細胞が十分増殖しうる条件は見いだせなかった。また、primary cultureによって平滑筋細胞を増殖させて検討したが、市販品の重層化の課程が難しく立体的な構築を作製することができなかった。2,in vitro培養系構築粘膜での各種パラメーターのアッセイ系の確立立体構築した多数種の細胞による培養系から、単一種の細胞を分離しアッセイ系を確立する予定であったが、上記の理由によりこの実験には至ることができなかった。3,ヒト手術材料より分離した細胞の移入ヒト消化管手術材料より上皮細胞、リンパ球、マクロファージの単離は90-95%のbiabilityとpurityをもって可能であった。しかし、我々の方法では上皮細胞は12時間でapoptosisに陥るため三次元培養系への移入は不可能と考えられた。また、単球系においても2日以上でbiabilityが著しく低下した。平滑筋細胞はprimary cultureにより、免疫組織化学で確認した限りではほぼ単一の細胞群を培養することが可能であった。

本研究の目的は、tissue engineeringの成果を活用することによりin vivoと従来のin vitroの系をつなぐものとして、多種類の細胞下らなり、3次元構築を維持し液性因子や細胞接着を通じて情報伝達が可能なシステムを作り上げることであった。1,各種バイオマテリアルを用いた多細胞系の確立マウス線維芽細胞株3T3細胞を滅菌したアガロースゲル上での培養を試みたところ、細胞の増殖は抑制されモノレーヤーを形成するに至らなかった。そこで、アガロースの種類や濃度を変え、かつ37度で固形化する条件などを検討したが、細胞が十分増殖しうる条件は見いだせなかった。また、primary cultureによって平滑筋細胞を増殖させて検討したが、市販品の重層化の課程が難しく立体的な構築を作製することができなかった。2,in vitro培養系構築粘膜での各種パラメーターのアッセイ系の確立立体構築した多数種の細胞による培養系から、単一種の細胞を分離しアッセイ系を確立する予定であったが、上記の理由によりこの実験には至ることができなかった。3,ヒト手術材料より分離した細胞の移入ヒト消化管手術材料より上皮細胞、リンパ球、マクロファージの単離は90-95%のbiabilityとpurityをもって可能であった。しかし、我々の方法では上皮細胞は12時間でapoptosisに陥るため三次元培養系への移入は不可能と考えられた。また、単球系においても2日以上でbiabilityが著しく低下した。平滑筋細胞はprimary cultureにより、免疫組織化学で確認した限りではほぼ単一の細胞群を培養することが可能であった。