ラット一次感覚神経細胞におけるジアシルグリセロールキナーゼの関与

二酰甘油激酶对大鼠初级感觉神经元的参与

• 批准号: 14657354
• 负责人: 福島 重宣
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657354/
• 关键词: ジアルシルグリセロール; 細胞内情報伝達機構; 後根神経節; 神経細胞; 細胞内局在; 抗体作製; 免疫組織化学; ジアシルグリセロール

ジアシルグリセロールキナーゼ(DGK)は、細胞内情報伝達系において膜脂質ジアシルグリセロールの量的調節によりプロテインキナーゼCの活性制御に関与する.後藤らはラット脳から数種類のDGKアイソザイムをクローニングし、脳内での特徴的遺伝子発現様式を明らかにしてきた.さらに後根神経節(DRG)においてはDGKζおよびιmRNAが強く発現していることを見いだしている.DGKζとιは核移行シグナルを有し、またDGKιには選択的スプライシングによる3つの変異体(ι-1、-2、-3)が存在する.本研究ではDRGにおけるDGKζとιの細胞内局在を免疫組織学的に比較検討した.まず、以前作製したラットDGKζの抗体に加え、DGKιの大腸菌発現タンパクに対する家兎免疫抗体を作成した.DGKιにはC末端側が異なる選択的スプライシングが存在するため、全ての変異体に共通するN末端抗体を作成した.生後8週Wistar系ラットを灌流固定後、DRGにおける免疫組織化学的解析を行った.その結果、大型神経節細胞においてDGKζ免疫陽性反応は核内に、またDGKιの反応は細胞質に検出された.一方小型細胞においてDGKιの免疫反応は大型細胞と同様に細胞質に認められたのに対し、DGKζの反応は核のみ、核と細胞質、細胞質のみと、異なる様々な様式を示すことが明らかとなった.DRGの大型・小型細胞のどちらにおいてもDGKζとιが異なる細胞局在を示すことは、類似構造を持つ二つのアイソザイムが異なる細胞内伝達機構に関与することを示唆する.特にDGKζは核と細胞質に様々な割合で認められることより、生理的条件下において核-細胞質間を移行する可能性が考えられる.現在、DGKιのスプライシング変異体解析のためC末端抗体を作成中であり、また神経因性疼痛時のDGKと各種神経ペプチドの発現量の変化の検討のためモデル動物を用いた実験を計画中である.

DGK is involved in the regulation of the amount of lipid in the membrane and in the regulation of the activity of C in the intracellular signaling system. Goto's response to a number of types of DGK software development is clear. In addition, DGK mRNA was strongly expressed in DRG cells.DGK mRNA was strongly expressed in DRG cells.DGK mRNA was strongly expressed in DRG cells. DGK mRNA was strongly expressed in DRG cells. In this study, we compared DRG with DGK and its intracellular structure in immunohistology. DGK is the first to produce E. coli antibody, DGK is the second to produce E. coli antibody, DGK is the third to produce E. coli antibody, DGK After 8 weeks of life, Wistar lines were perfused and fixed, and DRG cells were analyzed by immunohistochemistry. The results showed that DGK immunoreactivity was detected in the nucleus and cytoplasm of large neurons. The immune response of DGK in a small cell is different from that in a large cell. The immune response of DGK in a large cell is different from that in a large cell. The immune response of DGK in a large cell is different from that in a large cell. Similar structures are found in different intracellular transport mechanisms. In particular, DGK has been examined for the possibility of nuclear and cytoplasmic migration under physiological conditions. Now, DGK's structure changes and C-terminal antibodies are produced in the study of DGK and various neuropathic changes in the amount of neuropathic pain.

项目成果

長谷川浩士, 笹木勇人, 福島重宣, 高木理彰, 荻野利彦, 後藤 薫: "ラット脊髄後根神経節におけるジアシルグリセロールキナーゼζおよびιの細胞内局在に関する免疫組織学的検討"日本整形外科学会誌. (発表予定). (2004)

Hiroshi Hasekawa、Hayato Sasaki、Shigenobu Fukushima、Rio Takagi、Toshihiko Ogino、Kaoru Goto：“大鼠脊髓背根神经节中二酰基甘油激酶 ζ 和 ι 的细胞内定位的免疫组织学研究”（预定发表）。 ）