FE65による細胞内情報伝達機構の解明

FE65阐明细胞内信号转导机制

• 批准号: 20790049
• 负责人: 中矢 正
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20790049/
• 关键词: アルツハイマー病; FE65; APP; リン酸化; 核内移行; DNA損傷; ストレス応答; 細胞死

アルツハイマー病の原因因子APP(Amyloid Precursor Protein)はI型膜貫通タンパク質であり、その細胞質領域に結合する分子の一つFE65はAPPの代謝を制御していると考えられている。定常状態の細胞においてFE65は膜上のAPPに捕捉された状態で存在しているが、浸透圧ストレスを負荷することによってAPPがリン酸化され、これによってFE65がAPPから解離し、核内に移行することを明らかとしていた。本研究では、実際にAPPから解離したFE65が核内で斑点状に局在することをReal time imagingによって明らかとした。浸透圧ストレス負荷によってFE65の結合分子TIP60もまた斑点状に局在することを明らかとしたが、両分子の結合領域を欠いた変異体でも同様の現象が見られたことから、直接的に分子間で作用していない可能性が考えられた。次にFE65の遺伝子発現減弱細胞を作成し、浸透圧ストレス負荷による表現型を探索した結果、DNA損傷マーカーの誘導が弱いことが分かった。さらにFACSを用いて浸透圧ストレスにより誘発される細胞死を調べたところ、FE65遺伝子発現減弱細胞では有意に細胞死が多く、FE65の再導入によって細胞死を抑制することが分かった。これらの結果から、FE65及びAPPを介した新たな細胞ストレス応答機構を提唱した(Nakaya, etal, JBC、 Suzuki & Nakaya, JBC)。FE65がAPPに結合する同じ配列を認識する分子としてxll, xllLが知られている。このため、in vivoの状態ではFE65の機能発現に対し、上記分子の影響が出ることが考えられる。よって、これらの遺伝子を破壊したマウスを作成し、まずその表現型を解析した結果、APP代謝に変動があることが分かった(Saito, et.al., JBC)。

の ア ル ツ ハ イ マ ー disease causes factor APP (Amyloid we Protein) は type I transmembrane タ ン パ ク qualitative で あ り, そ の cytoplasmic domain に combining す molecules る の つ FE65 は APP の metabolic を suppression し て い る と exam え ら れ て い る. Steady state の cells に お い て FE65 は membrane の APP に capture さ れ た state で exist し て い る が, soak 圧 ス ト レ ス を load す る こ と に よ っ て APP が リ ン acidification さ れ, こ れ に よ っ て FE65 が APP か ら dissociation し, nuclear に transitional す る こ と を Ming ら か と し て い た. This study で は, be interstate に APP か ら dissociation し た FE65 が intranuclear で punctate に bureau in す る こ と を Real time imaging に よ っ て Ming ら か と し た. Soak 圧 ス ト レ ス load に よ っ て FE65 の combined with molecular TIP60 も ま た punctate に bureau in す る こ と を Ming ら か と し た が, struck molecular の combining domain を owe い た - variant で も with others の phenomenon が see ら れ た こ と か ら, direct に で effect between molecules し て い な い possibility が exam え ら れ た. Traces of time に FE65 の 伝 を 発 now weakened cells into し, soak 圧 ス ト レ ス load に よ る phenotype を explore し た results, DNA damage マ ー カ ー の induced が weak い こ と が points か っ た. さ ら に both FACS を with い て soak 圧 ス ト レ ス に よ り 発 lure さ れ る cell death を adjustable べ た と こ ろ, FE65 heritage 伝 発 now weakened cells で は intentionally に cell death が く, FE65 の to import に よ っ て cell death を inhibit す る こ と が points か っ た. こ れ ら の results か ら, FE65 and び APP を interface し た new た な cells ス ト レ ス 応 answer institutions を mention sing し た (Nakaya, etal, JBC, Suzuki & Nakaya, JBC). FE65 が APP に combining す る with じ match column を know す る molecular と し て XLL, xllL が know ら れ て い る. <s:1> ため, in vivo, the <s:1> state で で FE65, the occurrence of に on に, the influence of the above-mentioned molecular <s:1> が leads to る とが とが とが examination えられる. よ っ て, こ れ ら の posthumous son 伝 を broken 壊 し た マ ウ ス を し, consummate ま ず そ の phenotype を parsing し た results, metabolism of APP に - move が あ る こ と が points か っ た Saito, et. Al., (JBC).

项目成果

Xll proteins regulate the translocation of amyloid beta-protein precursor (APP) into detergent-resistant membrane and Suppress the amyloidogenic cleavage of APP-by beta-site-cleaving enzyme in brain

Xll 蛋白调节淀粉样 β 蛋白前体 (APP) 易位至耐去垢剂膜中，并抑制大脑中 β 位点裂解酶对 APP 的淀粉样蛋白形成裂解

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Biol. Chem 283
• 作者: Ando K;Maeda J;Inaji M;Okauchi T;Obayashi S;Higuchi M;Suhara T;Tanioka Y;Ando K;Tadashi Nakaya(他2名);Toshiharu Suzuki & Tadashi Nakaya;Fuchigami T;Yuhki Saito(他6名)
• 通讯作者: Yuhki Saito(他6名)

Regulation of FE65 nuclear translocation and function by amylola beta-protein precursor in osmotically stressed cells

渗透应激细胞中淀粉酶 β 蛋白前体对 FE65 核易位和功能的调节

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Biol. Chem 283
• 作者: Ando K;Maeda J;Inaji M;Okauchi T;Obayashi S;Higuchi M;Suhara T;Tanioka Y;Ando K;Tadashi Nakaya(他2名)
• 通讯作者: Tadashi Nakaya(他2名)

Regulation of amyloid beta-protein precursor by phosphorylation and protein interactions

通过磷酸化和蛋白质相互作用调节淀粉样β蛋白前体

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Biol. Chem 283
• 作者: Ando K;Maeda J;Inaji M;Okauchi T;Obayashi S;Higuchi M;Suhara T;Tanioka Y;Ando K;Tadashi Nakaya(他2名);Toshiharu Suzuki & Tadashi Nakaya
• 通讯作者: Toshiharu Suzuki & Tadashi Nakaya

Nuclear translocation of FE65 regulated by AFT in osmotically stressed cells

渗透应激细胞中 AFT 调节 FE65 的核转位

• 发表时间: 2008
• 作者: Ando K;Maeda J;Inaji M;Okauchi T;Obayashi S;Higuchi M;Suhara T;Tanioka Y;Ando K;Tadashi Nakaya(他2名);Toshiharu Suzuki & Tadashi Nakaya;Fuchigami T;Yuhki Saito(他6名);Yamasaki N;Tadashi Nakaya(他2名)
• 通讯作者: Tadashi Nakaya(他2名)