歯科用金属の溶出と局所免疫クロストークの相関性に関する研究
牙科金属洗脱与局部免疫串扰的相关性研究
基本信息
- 批准号:14657504
- 负责人:
- 金额:$ 2.05万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2003
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
p53遺伝子欠損マウス(以下p53KO)の皮膚,脾臓より樹状細胞(以下DC)を採取し、骨髄よりGM-CSFおよびIL-4にてDCを誘導した.得られたDCを用いて長期培養を試みたところ,継代に耐えうるものではなかった.そこで,C57BL/6Jマウス(以下B6)より同様にDCを採取し,p53KO由来DCと金属抗原に対する各種反応性を比較検討したところ,抗原特異的増殖反応,FACSによる細胞表面マーカー発現,およびサイトカイン産生能に著明な差は認められなかった.そこで歯科用金属抗原に対する反応性の検討には,B6由来DCを用いることとした.歯科用金属材料に含まれるNi, Co, Cr, Tiについて,PBSと生理食塩水中での溶出条件を検討した後,T細胞に対する細胞刺激能をMTT法と[^3H]サイミジンの取り込みにより検討した.T細胞の金属に対する増殖能とIL-2産生能は,Niに対して最大値を示し,Tiに対して最小値を示した.また,DCとT細胞の共培養実験においても同様の結果が得られた.さらに,金属刺激時のDC表面に発現する活性化マーカーを調べたところ,Niに対するCD80,CD86の発現上昇が認められた.なお, DCの臓器由来別では骨髄および皮膚由来DCの反応性が高いことが判明した.そこで局所免疫のクロストークの関与を検証するため,細胞移動・遊走を調節する因子の1つであるE-カドヘリンの発現パターンをウエスタンブロット法で検討した.その結果,耳介にNiアレルギーを発症させたB6の頚部リンパ節でE-カドヘリンタンパクの発現上昇が認められ,逆に耳介皮膚で発現減少が観察された.脾臓ではE-カドヘリン発現に変化は認められなかった.すなわち,皮膚のDCあるいはランゲルハンス細胞上のE-カドヘリン発現を減弱させ,DCを所属リンパ節へ遊走させる因子としてNiが機能していることが明らかとなった.
Traces of p53 伝 son owe loss マ ウ ス (hereinafter p53KO) の skin, splenic よ り dendritic cells (DC) を take し, bone marrow よ り gm-csf お よ び IL - 4 に て DC を induced し た. Have to ら れ た DC を with い て long-term training を try み た と こ ろ, resistance 継 generation に え う る も の で は な か っ た. そ こ で, C57BL / 6 j マ ウ ス (B6) よ り with others に DC を take し, p53KO origin DC と metal antigen に す seaborne る を compare various anti 応 sex beg し 検 た と こ ろ, antigen specific rights colonization 応, both FACS に よ る cell surface マ ー カ ー 発, お よ び サ イ ト カ イ ン can produce poor に zhao Ming な は recognize め ら れ な か っ た. そ こ で 歯 families with metal antigen に す seaborne る anti 応 sex の beg に 検 は, B6 origin DC を with い る こ と と し た. Youdaoplaceholder0 metallic materials for use に contain まれるNi, Co, Cr Ti に つ い て, PBS と physiological food salt water で の dissolution conditions を beg し 検 た, T cells に す seaborne る cells can stimulate を と determined by MTT method [^ 3 h] サ イ ミ ジ ン の take り 込 み に よ り beg し 検 た. T cells の metal に す seaborne る rights can yield と IL - 2 can produce は, Ni に し seaborne て numerical を し, the largest Ti に し seaborne て minimum numerical を shown し た の. ま た, DC と T cell co-culture be 験 に お い て も with others in the result of の が ら れ た. さ ら に, metal stimulation の DC surface に 発 now す る activeness マ ー カ ー を adjustable べ た と こ ろ, Ni に す seaborne る CD80, CD86 の 発 now rising が recognize め ら れ た. な お, DC の viscera origin don't で は bone marrow お よ び skin origin DC の 応 が high い こ と が.at し た. そ こ で bureau immune の ク ロ ス ト ー ク の masato and を 検 card す る た め, cellular mobile, wandering を adjust す る factor の 1 つ で あ る E - カ ド ヘ リ ン の 発 now パ タ ー ン を ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト method で beg し 検 た. そ の results, ear the に interface Ni ア レ ル ギ ー を 発 disease さ せ た B6 の 頚 department リ ン パ section で E - カ ド ヘ リ ン タ ン パ ク の 発 now rising が recognize め ら れ, inverse に ear interface skin で 発 now reduce が 観 examine さ れ た. Splenic で は E - カ ド ヘ リ ン 発 に now - the は recognize め ら れ な か っ た. す な わ ち, skin の DC あ る い は ラ ン ゲ ル ハ ン ス cells の E - カ ド ヘ リ ン 発 now weakened を さ せ, DC を belongs リ ン パ section へ wander さ せ る factor と し て Ni が function し て い る こ と が Ming ら か と な っ た.
项目成果
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