口腔癌における新規癌抑制遺伝子ING1,ING2の発現と治療への応用

新型抑癌基因ING1和ING2在口腔癌中的表达及其治疗应用

• 批准号: 14657530
• 负责人: 新谷 悟
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657530/
• 关键词: ING1; ING2; 口腔癌; P53

口腔癌細胞株における新規癌抑制遺伝子ING1,ING2の発現を検討するために、p33ING1,p33ING2の特異的なアミノ酸配列であるMLSPANGEQLHLVNYVE(ING1),QQLYSSAALLTGERSRLLTC(ING2)に対する抗体を作製した。この抗体により、口腔癌細胞株、口腔癌組織におけるp33ING1,p33ING2の発現を、Western Blotting法により検討するとともに、正常口腔粘膜上皮ならびに口腔扁平上皮癌組織に対し、Western Blotting法ならびに免疫組織化学的検索により発現を検討した。その結果、口腔扁平上皮癌細胞株10株においてING1,ING2は、その発現量に相違は認めるものの、検索したすべての検体において発現を認めた。また、ING1,ING2の発現量に相関はなく、これらの発現量と細胞増殖活性の関係も見いだせなかった。正常口腔粘膜上皮、前癌病変ならびに口腔癌組織においてもING1,ING2とも核にその発現を認め、これらの陽性細胞率や、発現量と腫瘍の増殖活性やリンパ節転移能などは相関しなかった。一方で、免疫沈降法により、p53との結合能を検討したところ、ING1,ING2ともに結合能が消失している細胞が見いだされた。以上より、ING1、ING2の欠失は口腔癌ではほとんど生じていないものの、いくらかの口腔癌においては、p53との結合異常による機能異常が生じ、癌化に関与している可能性が示唆された。なお、ING1、ING2の欠失した口腔扁平上皮癌細胞を見いだせなかったことから、pcDNA3-p33ING1,p33ING2の発現ベクターによる遺伝導入は行わなかった。

To investigate the development of new tumor suppressor genes ING1, ING2 in oral cancer cell lines, p33 ING1,p33 ING2 specific anti-tumor acid sequences were identified, such as SPANMLGEQLHLVNYVE (ING1),QQLYSSAALLTGERSRLLTC(ING2). p33ING1, p33ING2 expression in oral cancer cell lines, oral cancer tissues, Western Blotting assay, normal oral mucosa epithelium, oral squamous cell carcinoma tissues, Western Blotting assay, immunohistochemical assay. The results showed that there were 10 oral squamous cell carcinoma cell lines, and the expression of ING1 and ING2 was significantly different from that of the control group. The relationship between the amount of production and the activity of cell proliferation can be seen in the following table. Normal oral mucosa epithelium, precancerous lesions, and oral cancer tissues were identified by positive cell rates, positive cell rates, and tumor proliferation activities. The binding energies of p53 and p53 were detected by immunoprecipitation method. The binding energies of ING1 and ING2 disappeared. These findings indicate the possibility of oral cancer, p53, and abnormal binding, which may be related to oral cancer. OSCC cells with p33-p33 ING1, p33 ING2 and pcDNA3-p33 ING1,p33 ING2 were found to be deficient in p33-p33 ING1,p33 ING2.