リポソームカラムによる脂質膜と薬物の相互作用の解析法の開発

利用脂质体柱开发脂质膜与药物相互作用的分析方法

• 批准号: 14657567
• 负责人: 加茂 直樹
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657567/
• 关键词: リポソーム; カラムクロマトグラフ; HPLC; 溶離プロファイル; 溶離曲線の広がり; lipophilic phosphonium cation; 脂溶性イオン; 膜ベジクル固定化; 高速液体クロマトグラフィ; リポソームカラム; アビジン・ビオチン; 溶離パターン; 吸着速度定数; 脱着速度定数

薬物・化学物質と生体膜ないしは脂質膜(リポソーム)との相互作用を感度よく,精度よく測定する方法の開発を目指すとともに,生体膜と薬物との相互作用の機構を考察することを目的としている.リポソームをカラム材料に固定化して,HPLCの方法を利用して,脂溶性陽イオンであるtetraphenylphosphoniumおよびtriphenyl-n-alkyl (n=1-6)-phosphonium同族体のリポソームへの分配率を求めた.溶離位置は,それらホスフォニウムイオンの脂溶性に従っていた.一方,その溶出パターンを解析すると,単純なHPLCの溶出理論には合致しないことが分かった.すなわち,溶出パターンの広がり(二次モーメント)は,溶媒の流速に反比例するはずであるが,実験ではその流速の2乗に反比例した.その理由を検討して,リポソームカラムに対する理論式を構築した.この理論の骨子は,リポソームという大きな物体がカラム材料に固定化されているので,溶媒の流れは乱れてしまい,通常のHPLCの理論が適用出来ないと考え,ある範囲の薄い板状の部分では,HPLCの理論とは反対に,よく撹拌されている仮定したことである.この理論によれば,リポソームへの吸着や脱着速度が,流速とともに,溶離パターンを決める.そのため,実験からリポソームへの吸着や脱着速度を求められるようになった.その速度は,アルキル鎖のnの値の偶奇に依存した.これらホスフォニウムイオンの膜透過の速度や水和でも,偶奇性が見られており,その原因の分子論的な解明が次の問題である.バクテリアの膜ベジクルの固定化を試みている.これにより,膜タンパクと基質との相互作用が調べることが出来る.

The sensitivity and accuracy of the method for determining the interaction between biological and chemical substances and lipid membranes were investigated. Immobilization of triphenyl-n-alkyl (n=1-6)-phosphine homologues by HPLC method was used to determine the partition ratio of tetraphenylphosphine homologues to triphenyl-n-alkyl (n=1-6)-phosphine homologues. The position of dissolution is different from that of lipid dissolution. The dissolution theory of HPLC is based on the theory of pure HPLC. The dissolution rate of the solvent is inversely proportional to the dissolution rate of the solvent. The reason for this is to construct a theoretical formula. This theory is based on the theory that the solvent flow is not stable, and the HPLC theory is applicable. This theory is based on the theory that the adsorption and desorption velocities, velocities, and dissolution parameters are determined. The speed of absorption and detachment is determined by the speed of absorption and detachment. The speed of the lock is dependent on the value of the lock. The solution of the molecular theory of the reason for the singularity of the membrane transmission speed of water and water. Immobilization of the membrane was studied. The interaction between the membrane and the matrix is modulated.

项目成果

Masako Ohno et al.: "Kinetic studies on the optical resolution of 2-alkanol by Psudomonas cepacia Lipase catalyzed transesterification with vinyl acetate in organic solvent"J. Oleo Sci.. 51. 643-653 (2002)

Masako Ohno等：“洋葱假单胞菌脂肪酶催化有机溶剂中与乙酸乙烯酯的酯交换反应光学拆分2-烷醇的动力学研究”J.

W.Hu, P.R.Haddad, K.Hasebe, M.Mori, K.Tanaka, M.Ohno, N.Kamo: "Use of biomimetic chromatographic stationary phase for study of the phosphatidylcholine membranes"Biophys.J.. 83. 3351-3356 (2002)

W.Hu、P.R.Haddad、K.Hasebe、M.Mori、K.Tanaka、M.Ohno、N.Kamo：“使用仿生色谱固定相研究磷脂酰胆碱膜”Biophys.J.. 83. 3351-

Wenzhi Hu et al.: "Use of biomimetic chromatographic stationary phase for study of the phosphoatidylcholine membranes"Biophys. J.. 83. 3351-3356 (2002)

Wenzhi Hu 等人：“使用仿生色谱固定相研究磷脂酰胆碱膜”Biophys。

Xue-Ying Liu et al.: "Immobilized liposome chromatography to study drug-membrane interaction : Correlation with drug absorption in humans"J Chromatography A.. 961. 113-118 (2002)

刘雪英等人：“固定脂质体色谱法研究药物-膜相互作用：与人体药物吸收的相关性”J Chromatography A.. 961. 113-118 (2002)

W.Hu, P.R.Haddad, K.Tanaka, M.Mori, K.Hasebe, M.Ohno, N.Kamo: "Creation and characteristics of phosphatidylcholine stationary phases for the chromatographic separation of inorganic anions"J.Chromatogr.A.. 997. 237-242 (2003)

W.Hu、P.R.Haddad、K.Tanaka、M.Mori、K.Hasebe、M.Ohno、N.Kamo：“用于无机阴离子色谱分离的磷脂酰胆碱固定相的创建和特性”J.Chromatogr.A..