超高解像度2次元電気泳動法を用いた神経極性形成タンパク質のネットワーク解析

使用超高分辨率二维电泳对神经极性形成蛋白进行网络分析

• 批准号: 15650058
• 负责人: 稲垣 直之
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15650058/
• 关键词: 神経細胞; 軸索; タンパク質翻訳合成; 細胞極性; プロテオーム; 2次元電気泳動法; 網羅的機能解析; メタボリックラベル; 質量分析法; ゲル内消化法; ALS; 細胞内ネットワーク

神経細胞は、1本の軸索と複数の樹状突起を有し極性を形成する。神経極性は、神経細胞の基本的な機能であるシグナルの入出力や統合に重要な役割を果たすにも関わらず、その形成および維持の分子機構は未だよくわかっていない。本研究は、我々が独自に開発した高感度2次元電気泳動法を用いて神経極性および神経軸索形成に関わる分子群を網羅的に同定し、神経極性や神経軸索形成の分子機構をシステマティックに明らかとすることを目的としている。昨年度までの研究から、高感度2次元電気泳動法と質量分析装置を用いて82個の神経軸索に濃縮するタンパク質を同定した。興味深いことに、タンパク質の合成や分解に関連する分子がその内訳として20.8%と最も高い割合を占めていた。神経軸索内のタンパク質はこれまで主に細胞体で翻訳合成されて軸索に輸送されると考えられてきたが、最近、神経軸索内でのタンパク質の翻訳合成が軸索の伸長やガイダンスに重要な役割を果たす可能性が示唆されてきている。我々のデーターはこの考えをサポートするが、神経軸索内で翻訳合成されるタンパク質は現時点ではほとんどわかっていない。そこでさらに本年度は、高感度2次元電気泳動法とタンパク質のメタボリックラベルを組み合わせることにより、神経軸索内で翻訳合成されるタンパク質の網羅的検出を試みた。その結果、驚くべきことに細胞体で翻訳合成されるタンパク質の大部分が軸索でも合成されることがわかった。またこれらの中から、軸索でより多く翻訳合成されるタンパク質15個を検出し、質量分析によりそのうちの12個の同定に成功した。これらの中にはニューロフィラメントやアクチン結合タンパク質など、神経軸索形成に重要な役割を担う可能性のある興味深い分子が含まれていた。

A number of <s:1> tree-like protrusions を with <s:1> polarity を are formed する. God 経 は polarity, 経 cell の basic な で あ る シ グ ナ ル の integration into the output や に important な "を cut fruit た す に も masato わ ら ず, そ の form お よ び maintain の は molecules is not だ よ く わ か っ て い な い. は, this study I 々 が に alone open 発 し た Gao Gan degree 2 dimensional 気 swimming method を with い て god 経 polarity お よ び god 経 axon form に masato わ る molecular group of に を net with し, god 経 polarity や 経 axon form の molecules institutions を シ ス テ マ テ ィ ッ ク に Ming ら か と す る こ と を purpose と し て い る. Yesterday's annual ま で の research か ら, Gao Gan 2 dimensional 気 swimming method と を quality analysis device with い て 82 の god 経 axon に enrichment す る タ ン パ ク qualitative を with fixed し た. Takes deep い こ と に, タ ン パ ク qualitative の synthetic や decomposition に masato even す る molecular が そ の within 訳 と し て 20.8% と accounts for the high も い cut close を め て い た. Within god 経 axon の タ ン パ ク qualitative は こ れ ま で main に cell body で turn 訳 synthetic さ れ て axon に conveying さ れ る と exam え ら れ て き た が, recently, god 経 axon in で の タ ン パ ク qualitative の turn 訳 synthetic が axon の elongation や ガ イ ダ ン ス に important な "を cut fruit た が す possibility in stopping さ れ て き て い る. I 々 の デ ー タ ー は こ の exam え を サ ポ ー ト す る が, god 経 axon で in turn 訳 synthetic さ れ る タ ン パ ク qualitative は now point で は ほ と ん ど わ か っ て い な い. そ こ で さ ら に は this year, 2 dimensional Gao Gan degrees 気 swimming method と タ ン パ ク qualitative の メ タ ボ リ ッ ク ラ ベ ル を group み close わ せ る こ と に よ り, god 経 axon で in turn 訳 synthetic さ れ る タ ン パ ク qualitative の snare 検 try out を み た. そ の results, jing く べ き こ と に cell body で turn 訳 synthetic さ れ る タ ン パ ク qualitative の most が axon で も synthetic さ れ る こ と が わ か っ た. In ま た こ れ ら の か ら, axon で よ り く turn more 訳 synthetic さ れ る タ ン パ ク qualitative 15 を 検 し, quality analysis に よ り そ の う ち の 12 の be に successful し た. In こ れ ら の に は ニ ュ ー ロ フ ィ ラ メ ン ト や ア ク チ ン combining タ ン パ ク qualitative な ど, god 経 axon form に cut を bear important な service う possibility の あ interests contains deep い molecular が ま る れ て い た.

项目成果

Inagaki, N., et al.: "Electrophorese bidimensionnelle haute resolution sur gel extra large pour la proteomique"BIOforun Europe Edition Francaise. 1. 28-29 (2003)

Inagaki, N. 等人：“Electrophorese bidimensionnelle haute resolution sur gel extra Large pour la protomique”BIOforun 欧洲版法语。

Axon formation and elongation employing nerve growth cone localized molecule shootin1 or its splicing variants, and applications for nerve regeneration

利用神经生长锥局部分子shootin1或其剪接变体形成轴突和伸长，以及在神经再生中的应用

• 发表时间: 2005

神経成長円錐局在分子Shootin1もしくはそのスプライシングバリアントを利用した神経軸索の形成・伸長と神経再生への応用

使用神经生长锥局部分子 Shootin1 或其剪接变体应用于神经轴突的形成和延伸以及神经再生

• 发表时间: 2004

Suzuki, Y., et al.: "Collapsin response mediator protein-2 accelerates axon regeneration of nerve-injured moter neurons of rat"J.Neurochem.. 86. 1042-1050 (2003)

Suzuki, Y., et al.：“塌陷反应介导蛋白-2 加速大鼠神经损伤运动神经元的轴突再生”J.Neurochem.. 86. 1042-1050 (2003)

Nomura, E., et al.: "Acid-labile surfactant improves in-solution dodecyl sulfate polyacrylamide gel protein digestion for matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometric peptide mapping"J.Mass Spectrometry. 39・2. 202-207 (2004)

Nomura, E. 等人：“酸不稳定表面活性剂改善了基质辅助激光解吸/电离质谱肽图谱中的溶液内十二烷基硫酸盐聚丙烯酰胺凝胶蛋白质消化”J.Mass Spectrometry 39・2。 2004）