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メッセンジャーRNAの卵細胞注入で発現したイオンチャネル活動の解析

信使RNA注射到卵细胞中表达的离子通道活性分析

基本信息

批准号：
60480111
负责人：
山岸俊一
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至 1986
项目状态：
已结题

项目摘要

上記研究課題の研究計画について昭和61年度は主としてmRNAの注入によって発現するアミノ酸リセプターとそれに共役するイオンチャネルについての電気生理的解析,およびムスカリン性アセチルコリンリセプター等の細胞内反応過程におけるプロテインキナーゼの関与について解析した。中枢神経系における興奮性アミノ酸受容体は薬理学的に3つのサブタイプ(NMDAタイプ,キスカル酸タイプ,カイニン酸タイプ)に分類されているが、われわれのグループはラット脳から抽出したmRNAをアフリカツメガエルの卵細胞に注入し、キスカル酸タイプとカイニン酸タイプの受容体が発現することを確認した。さらに、これまで明らかにされていなかった新しいタイプのグルタミン酸受容体の発現を見出した。この受容体はムスカリン性Ach受容体と共通の細胞内反応過程を介してClチャネルと共役していることが明らかとなった。ムスカリン性Ach応答はホルボールエステルの一種TPAにより阻害され、阻害部位はリセプター蛋白,G蛋白,ホスホリパーゼCの全部または一部であること、さらにムスカリン性Ach応答はカルモジュリン依存性キナーゼを介してClチャネルと共役していることを明らかにした。また小腸上皮細胞よりmRNAを抽出した後卵細胞に注入しNa,D-グルコース共輸送キャリアー蛋白を発現させることを試みたが、充分な量のmRNAを抽出できるには至らず、少量のため卵細胞における発現を確認するに至らなかった。油圧四方向マイクロマニピュレータは卵細胞に微小電極を刺入する際の微細なコントロールのために使用した。

The above research project was carried out in Showa 61 to analyze the electrophysiological characteristics of the intracellular reaction process such as the gene expression of the main gene and the gene expression of the main gene. Central nervous system excitatory acid receptors are classified into three groups of receptors (NMDA, NMDA, NMDA) and identified as receptors that are injected into egg cells and expressed in egg cells. The discovery of new acid receptors has been observed. The receptor is a common intracellular reaction process mediated by the receptor. A kind of TPA inhibitor, the inhibitor site, the G protein, the inhibitor site, the inhibitor site. The expression of mRNA in small intestine epithelial cells was determined by DNA sequencing. The oil pressure four directions are used when the microelectrode is inserted.