课题基金 / 基金详情

絶対共生細菌の生産する耐熱性β-チロシナ-ゼ遺伝子のクロ-ン化と共生機構の解明

絶対共生細菌の生産する耐熱性β-チロシナ-ゼ遺伝子のクロ-ン化と共生機構の解明
专性共生菌产生的耐热β-酪氨酸酶基因的克隆及共生机制的阐明
批准号：
63470113
负责人：
別府 輝彦
金额：
$4.42万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1988 至 1989
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63470113/
关键词：
好熱性共生細菌β-チロシナ-ゼトリプトファナ-ゼ遺伝子クロ-ニング共生絶対共生細菌β-チロシナーゼクローニング

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
好熱性共生細菌Symbiobacterium thermophilumの生産する耐熱性β-チロシナ-ゼ(Tyase)酵素蛋白の精製法の確立、Tyase蛋白のCNBr化学分解後にHPLCで分取した2ペプチドの部分アミノ酸配列の決定により、本Tyaseは我々が以前クロ-ン化、塩基配列決定したトリプトファナ-ゼと非常に相同性が高いことが明らかになった。従って、TPaseをプロ-ブとしてTyaseのクロ-ン化を試みたが、取得したものはTyaseでなく、本菌の有する第2のTPaseであることが判明した。なお、このTPaseについては塩基配列の決定および大腸菌での大量発現に成功した。しかしその後、TPaseをプロ-ブとして弱くハイブリダイズするDNA断片を取得し、そのC末端付近の塩基配列決定を行ったところ、TPaseと約50%という高い相同性を保持していて、これがTyaseであると推定している。この遺伝子の全長を取得すべく、サザンハイブリダイゼ-ションを行い、約4.3kb断片をクロ-ン化して、現在この全塩基配列の決定および大腸菌での大量発現させた蛋白のアッセイによるβ-チロシナ-ゼとしての確認を続行中である。一方、S.thermophilumと新種のBacillus属の一菌株との共生機構の解明については、その後共生因子の検定菌であるS.thermophilumのBacillus菌よりの分離法の改良など種々の検討を加え、Bacillusの菌体破砕上清画分に何らかの共生因子が存在することが示唆された。現在、共生因子の精製、その同定を行なうと共に、S.thermophilumが純粋培養可能となった後に、その分類上の位置、性質等を調べるつもりでいる。
英文摘要
好熱性共生細菌Symbiobacterium thermophilumの生産する耐熱性β-チロシナ-ゼ(Tyase)酵素蛋白の精製法の確立、Tyase蛋白のCNBr化学分解後にHPLCで分取した2ペプチドの部分アミノ酸配列の決定により、本Tyaseは我々が以前クロ-ン化、塩基配列決定したトリプトファナ-ゼと非常に相同性が高いことが明らかになった。従って、TPaseをプロ-ブとしてTyaseのクロ-ン化を試みたが、取得したものはTyaseでなく、本菌の有する第2のTPaseであることが判明した。なお、このTPaseについては塩基配列の決定および大腸菌での大量発現に成功した。しかしその後、TPaseをプロ-ブとして弱くハイブリダイズするDNA断片を取得し、そのC末端付近の塩基配列決定を行ったところ、TPaseと約50%という高い相同性を保持していて、これがTyaseであると推定している。この遺伝子の全長を取得すべく、サザンハイブリダイゼ-ションを行い、約4.3kb断片をクロ-ン化して、現在この全塩基配列の決定および大腸菌での大量発現させた蛋白のアッセイによるβ-チロシナ-ゼとしての確認を続行中である。一方、S.thermophilumと新種のBacillus属の一菌株との共生機構の解明については、その後共生因子の検定菌であるS.thermophilumのBacillus菌よりの分離法の改良など種々の検討を加え、Bacillusの菌体破砕上清画分に何らかの共生因子が存在することが示唆された。現在、共生因子の精製、その同定を行なうと共に、S.thermophilumが純粋培養可能となった後に、その分類上の位置、性質等を調べるつもりでいる。
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
K.Hirahara: "Cloning and nucleotide sequence of a second thermostable tryptophanase from Sybbiobacterium thermophilum" in preparation.
K.Hirahara：“来自嗜热共生杆菌的第二种热稳定色氨酸酶的克隆和核苷酸序列”正在准备中。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
K.Hirahara: "Cloning and nucleotide sequence of thermostable bata-tyrosinase from Symbiobacterium thermophilum"
K.Hirahara：“来自嗜热共生杆菌的热稳定性蝙蝠酪氨酸酶的克隆和核苷酸序列”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Suzuki: J.Gen.Microbiol.134. 2353-2362 (1988)
S.Suzuki：J.Gen.Microbiol.134。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
環境微生物の培養特性を利用した新しい微生物の探索
  • 批准号：
    19658037
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.18万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    別府 輝彦
  • 依托单位：
    Nihon University
微生物による有用カロテノイド生産のための探索および分子生物学的研究
  • 批准号：
    05F05198
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    別府 輝彦
  • 依托单位：
    Nihon University
環境微生物の培養特性の解明とそれを利用する新しい微生物資源の開発
  • 批准号：
    16658038
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.37万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    別府 輝彦
  • 依托单位：
    Nihon University
新しいG1,G2期特異的細胞周期阻害剤の探索とそれを用いた増殖制御機構の解析
  • 批准号：
    04253209
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $15.36万
  • 财政年份：
    1993
  • 负责人：
    別府 輝彦
  • 依托单位：
    The University of Tokyo