スローKチャネル中性アミノ酸残基置換による電位依存性活性化ゲーティングの変化

慢 K 通道中中性氨基酸残基取代导致电压依赖性激活门控的变化

• 批准号: 04670048
• 负责人: 老木 成稔
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes (1993)Kyoto University (1992)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670048/
• 关键词: スローKチャネル; 電位依存性ゲーティング; 中性アミノ酸置換; キネティクス; 脂質平面膜法; アミノ酸置換

スローKチャネルを発現させたツメガエル卵母細胞をカット・オープン法で記録することによって長時間安定な記録が可能となった。同時にこの方法は速い電位固定も可能であるので、電位依存性活性化過程の初期の過程を捉えられた。このようにして得られた電流記録のキネティクス解析を行ない、変異によって電位依存性が過分極側にシフトすることがあきらかになった。みかけ上活性化過程が速くなるのは指数関数の速い成分が相対的に大きくなっているためであった。静止電位での定常状態の分布が野生型にくらべ開状態に近いところに分布すると考えられる。電位依存性がシフトするという事実とあわせると膜貫通部位のロイシンからイソロイシンに置換することによって疏水性相互作用が弱くなり、チャネル閉状態の安定性が悪くなるという解釈が最も妥当である。中性アミノ酸置換の効果を状態図の枠組みの中で捉えることができた。卵母細胞に発現したスローKチャネルを膜分画として取り出し、脂質平面膜に膜融合で組み込み、チャネル活性の記録を単一チャネルレベルで行うことを試みたが、明瞭な単一チャネル活性は記録できなかった。ナイスタチン法などを使って技術的な問題点は全てクリアしているから、単一チャネル電流の大きさが私達の方法でも検出できない程度に小さいと結論せざるを得ない。ごく最近提出された膜を2回貫通するというモデルを検討したところ、このモデルでも十分に私達の実験結果を説明できることが判明した。このモデルから引き出される他のカチオンチャネルとの関連について検討した。

It is important to determine whether there is any change in the size of the oocyte. The method is used to record the stability of the oocyte over a long period of time. At the same time, the method of rapid potential fixation may lead to significant changes in the early stages of the potential-dependent activation process. It is necessary to improve the accuracy of current recording and analysis, as well as the level of potential dependence. The number of active process parameters on the device is similar to that of the components in the same range. Steady state distribution of static electric potential station, wild type, close range, steady state, steady state distribution, wild type, close range, steady state, steady state, steady state distribution, wild type, close range, steady state, steady state and wild type. The potential dependence of the membrane on the hydrophobicity of the membrane is sensitive to the hydrophobicity of the hydrophobic. the hydrophobic interaction is weak and the stability is the most appropriate. The neutral acid is used to make sure that the fruit is in the middle of the group. The oocytes were divided into two parts: the oocyte, the oocyte, the membrane, the activity, the activity. The general method makes it possible to improve the accuracy of the whole system, and the private access method of the electronic current system can be used to determine the degree of failure. Recently, we have proposed that we should make sure that the information is available twice and that the information is very private. The results show that the information is correct. I don't know what to do. I don't know what to do.

项目成果

S.Oiki: "A dipolar amino acid substitution induces voltage-dependent transitions betweentwo stable conductance states in gramicidin channels" Biophys.J.62. 28-30 (1992)

S.Oiki：“偶极氨基酸取代会诱导短杆菌肽通道中两个稳定电导状态之间的电压依赖性转变”Biophys.J.62。

S.Oiki: "Towands Molecular Biophysics of Ion Channels" M Sokabe,A.auerbach & F.J.Sigworth, (1994)

S.Oiki：“了解离子通道的分子生物物理学”M Sokabe，A.auerbach

S.Oiki: "Asymmetric gramicidin channels:Heterodimeric channels with a single foVal^1 residue." Biophys.J. (in press).

S.Oiki：“不对称短杆菌肽通道：具有单个 foVal^1 残基的异二聚体通道。”

S.Oiki: "Alterations of gating parameters by neutral substitations of transmembrane Leu^<52> of slow potassium channel" Ann.N.Y.Acad.Sci.(1993)

S.Oiki：“通过慢钾通道跨膜 Leu^<52> 的中性取代来改变门控参数”Ann.N.Y.Acad.Sci.(1993)

S.Oiki: "Alterations of gating parameters by neutral substitutions of transmembrane leu^<52> of slow potassium channel." Ann.N.Y.Acad.Sci. 707. 402-405 (1993)

S.Oiki：“通过慢钾通道的跨膜 leu^<52> 的中性取代来改变门控参数。”