甲状腺外TSH受容体:遺伝子発現調節機構およびその病態生理的意義

甲状腺外TSH受体：基因表达调控机制及其病理生理意义

• 批准号: 04671500
• 负责人: 磯崎 収
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04671500/
• 关键词: TSH受容体; mRNA; リンパ球; 線維芽細胞

1.リンパ球におけるTSH受容体遺伝子発現:正常人、バセドウ病患者、橋本病患者の末梢血より単核球を採取し、1%Phitohemagulutinin(PHA)存在下にて7日間培養し細胞数を増加させた後、各種薬剤添加をして培養を行いmRNAを抽出した。次にReverse Transcriptaseを用いてcDNAを作成し、Polymerase Chain Reaction(PCR)を行いTSH受容体の遺伝子の増幅を行ないTSH受容体mRNAの測定を行った。TSH受容体の細胞外部分及び細胞内部分を増幅するPCR primerを用いて増幅を行ったがTSH受容体に特異的なmRNAの増幅が認められリンパ球にTSH受容体が存在することが判明した。また、Reverse TranscriptionにおいてPCRの3'のprimerを用いることにより定量的PCRを行いTSH受容体mRNAの定量を試みた。正常人、橋本病患者に比較してバセドウ病患者リンパ球においてはmRNAの量が多い傾向が認めら,バセドウ病の進展にリンパ球TSH受容体が何らかの役割を果たしていることが示唆された。次にリンパ球におけるTSH受容体mRNAに対する各種薬剤の影響を検討した。まず、PHAはTSH受容体mRNAを減少させたがTransforming growth factor(TGF)‐bのmRNAを増加させた。TSHによる影響は認められなかった。次に細胞の分化を促進するRetinoic Acid及びPhorbol esterであるPMAにおいても影響が認められなかった。その他、IL‐6,TGF‐b,Endothelinの影響を検討したが影響は認められなかった。2.線維芽細胞におけるTSH受容体遺伝子発現:まず、正常人皮膚線維芽細胞を用いてリンパ球と同様にTSH受容体mRNAの測定をPCR法を用いて行った。Fetal Calf Serum(FCS)存在下で培養した細胞も、無血清で培養下細胞においてもTSH受容体mRNAは認められなかった。また、TSH,IL‐6,TGF‐b,bFGFによる影響を検討したがTSH受容体mRNAの発現は認められなかった。次に、Pretibial dermopathyの認められたバセドウ病患者1例の患部皮膚線維芽細胞について検討を行ったところTSH受容体mRNAが認められ、線維芽細胞TSH受容体の発現の病態生理的意義が示唆された。3.Heat Shock Proteinの発現調節機構:バセドウ病患者における後眼窩線維芽細胞およびPretibial dermopathyにおけるheat shock protein70の発現におけるTSH受容体の関与を検討するため、まず甲状腺細胞におけるHSP70遺伝子発現に対するTSHの影響を検討した。TSHの前投与はHeat shockによるHSP70mRNAの増加を抑制することが判明しHSP70遺伝子発現に対するTSH受容体の関与が示唆された。

1. リ ン パ ball に お け る TSH by let body heritage 伝 son 発 now: normal, バ セ ド ウ disease, hashimoto disease の peripheral blood よ り 単 nuclear ball を adopt し, 1% Phitohemagulutinin (PHA) in the presence of に て 7 day culture し cell number を raised plus さ せ た after, all kinds of 薬 tonic add を し て line cultivate を い mRNA を smoke Out of た. Time に Reverse Transcriptase を with い て cDNA を make し, Polymerase Chain Reaction (PCR) line を い TSH is let body の heritage 伝 son の raised painting line を な い TSH by let body mRNA の line measurement を っ た. TSH is の extracellular volume body parts and び intracellular を rights of す る PCR primer を with い て raised line of を っ た が TSH by let body に specific な mRNA の raised が picture recognition め ら れ リ ン パ ball に TSH by let body exist が す る こ と が.at し た. ま た, Reverse Transcription に お い て PCR の 3 'の primer を with い る こ と に よ り quantitative PCR line を い TSH is let body mRNA の quantitative を try み た. Normal, comparison of hashimoto disease に し て バ セ ド ウ patients リ ン パ ball に お い て は mRNA の quantity が い tend が recognize め ら, バ セ ド の ウ disease progress に リ ン パ ball TSH by what let body が ら か の "を cut fruit た し て い る こ と が in stopping さ れ た. The におけるTSH of the にリ パ パ sphere is affected by the に of the mRNA of the container against する various drug poisonments を検 and を検 た. Youdaoplaceholder0, PHA まず TSH receptor mRNAを decreased させたがTransforming growth factor(TGF) -b <s:1> mRNAを increased させた. TSHによる affects recognition められな った. Time に cells の を promote す る Retinoic Acid and び Phorbol ester で あ る PMA に お い て も influence が recognize め ら れ な か っ た. Youdaoplaceholder0 <s:1> he, IL-6,TGF - β b,Endothelin <s:1> influence を検 discussion たが influence recognize められな った った. Line 2 d bud cells に お け る TSH by body but 伝 son 発 : modern ま ず, normal skin line d bud cells を い て リ ン パ と ball with others に TSH by let body mRNA の を determination を PCR method with い て line っ た. In the presence of Fetal Calf Serum(FCS), で culture of <s:1> た cells <e:1>; in the absence of serum, で culture of cells にお で て て <s:1> TSH receptor mRNA た recognition められな められな った った. ま た, TSH, IL ‐ 6, TGF ‐ b, bFGF に よ る influence を beg し 検 た が TSH by let body mRNA の 発 は now recognize め ら れ な か っ た. に, Pretibial dermopathy の recognize め ら れ た バ セ ド ウ disease, 1 case of の skin line affected part d bud cells に つ い て 検 line for を っ た と こ ろ TSH by let body mRNA が recognize め ら れ TSH, line d bud cells by let body の 発 is の pathological physiological significance が in stopping さ れ た. 3. Regulatory mechanism of Heat Shock Protein: における posterior orbital line endothelial cells およびPretibial dermopathyにおけるheat shock in patients with バセドウ Protein70 の 発 now に お け る TSH by let body の masato and を beg す 検 る た め, ま ず thyroid cell に お け る HSP70 posthumous son 伝 発 now に す seaborne る TSH の influence を beg し 検 た. TSH and は の years ago to Heat shock に よ る HSP70mRNA の raised を requirement by inhibiting す る こ と が.at し HSP70 heritage 伝 son 発 now に す seaborne る TSH by let body の masato and が in stopping さ れ た.