核融合・二倍体形成過程の分子遺伝学的解析
核融合和二倍体形成过程的分子遗传学分析
基本信息
- 批准号:04680256
- 负责人:
- 金额:$ 1.15万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1992
- 资助国家:日本
- 起止时间:1992 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
分裂酵母における核融合と二倍体形成過程に欠損をもつ突然変異体の分離を試みた。分裂酵母のmeil変異体では半数体細胞の接合と核融合はおこるが、それに引き続く減数分裂に入れない。この性質を利用して、ニトロソグアニジン処理したホモタリックmeil株をphloxinBを含む培地にまき、コロニー中の二倍体形成頻度の低下したと考えられる株を分離した。この培地上では二倍体は濃い赤色の、半数体は白色のコロニーを作る。候補株を次に、フローサイトメトリー法、細胞学的方法ならびに遺伝学的方法で解析した。このようにして、これまでに核融合に欠損をもつ株1株、核融合には欠損を示さないが安定な二倍体を形成できないもの3株を分離した。このような性質をもつ突然変異体は、分裂酵母においてはこれまでに報告されていない。これらの分離株のうち、核融合欠損株についてさらに詳しく解析した。突然変異は1つの核性遺伝子に由来する劣性変異であり、遺伝子をkarlと命名した。karl変異により、接合後 90%の核融合がおこらなくなる。またmeil変異を除いた条件では、胞子形成能はもつが、形成される胞子の数と形に著しい異常が認められた。karl変異を相補する遺伝子DNAを分離するために、異常胞子形成を選択指標として、コスミドライブラリーをスクリーニングした。調ベた約600のコスミドのうち、3つのコスミドが相補能を示した。このうち2つは制限酵素切断パターンから同一の部分を含むと考えられた。このうちの1つをサブクローンして、最終的に2.2KbのDNA断片を分離した。組み込みマッピングによってこのDNAがKarl由来であることも確めた。現在 このDNAの塩基配列を決定中である。
The process of mitotic yeast nuclear fusion and diploid formation is incomplete, and the process of abrupt heterosis is attempted. The mitotic yeast meil is divided into half somatic cells, and the fusion nucleus is divided into two parts. The frequency of diploid formation in the plant was lower than that in the control plant. On the ground, the diploid is red and the half is white. Candidate strain analysis, cytological analysis, and genetic analysis 1 plant with nuclear fusion defect, 3 plants with nuclear fusion defect and 3 plants with stable diploid formation The nature of this disease is suddenly changed, and the yeast is split. This is the first time that a plant has been isolated and fused. A sudden change in the origin of a nuclear gene is a change in the nature of a gene. Karl fusion is 90% after fusion. The number and shape of the spores can be determined by the difference between the conditions. Karl heterozygote DNA isolation, abnormal spore formation, selection criteria, selection criteria, selection criteria The adjustment is about 600 degrees, 3 degrees and 3 degrees. The enzyme is cut off from the same part of the body. The final 2.2Kb DNA fragment was isolated. The first time I saw him was when I was a kid. Now the DNA base alignment is determined.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
T.Takahashi: "A low copy number scquence with strict summetry and unusul chromctin structure in fission yeast centromere" Mol.Biol.Cell. 3. 819-835 (1992)
T.Takahashi:“裂殖酵母着丝粒中具有严格统计和不寻常染色质结构的低拷贝数序列”Mol.Biol.Cell。
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丹羽 修身其他文献
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