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有糸分裂における染色体の協調的挙動のモニタリング機構

有丝分裂过程中监测染色体协调行为的机制

基本信息

批准号：
05680609
负责人：
丹羽修身
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

分裂酵母の第III染色体動原体反復配列領域のほぼ全体を含む巨大な環状ミニ染色体(CM3354)が有糸分裂において不安定であり、sta遺伝子突然変異や多コピーの動原体dg-dh配列の導入によって安定化されることが既に明らかになっていた。またCM3354のような不安定なミニ染色体が存在すると有糸分裂の進行に遅延が起こることも明らかになっていた。本研究では、まずCM3354の有糸分裂における安定性が核内のII型DNAトポイソメラーゼの活性によって著しく影響されることを明らかにした。即ち、top2遺伝子の多コピー導入によってミニ染色体が安定化するが、温度感受性のtop2変異をもつ細胞内では逆に著しく不安定化することが分かった。dg-dh配列による安定化活性はtop2温度感受性変異による不安定化を打ち消した。これはdg-dh配列とtop2遺伝子の間に遺伝的相互作用があることを示す。dg-dh配列の安定化活性をサブクローニング法によって解析したところ、活性はdh配列の1kbの範囲内に局在することが明らかになった。CM3354を安定化させる突然変異として同定したsta遺伝子のうち、cdc2温度感受性変異のサプレッサー活性をもつsta2およびsta3は、これまでに遺伝学的にcdc2のサップレッサーとして同定されていたsuc1およびcdc13のいずれとも異なる遺伝子であることが分かった。したがってこれらの遺伝子はcdc2と相互作用する新しいクラスの遺伝子と考えられる。また、sta3突然変異体においては、CM3354が存在しても、有糸分裂の遅延が部分的に消失することも明らかになった。sta3遺伝子は不安定な染色体の存在をモニターする細胞因子の一つであることが強く示唆された。さらにsta1変異と相補するDNAの解析から、この遺伝子は紡錘体極体の成分である可能性が示唆された。

The chromosome III of the mitotic yeast is repeatedly aligned in the whole region, including a giant circular chromosome (CM3354), which is unstable and unstable at the end of the mitotic process, and a sudden change in the chromosome. The introduction of dg-dh alignment of the multiple chromosomes is stable. CM3354 is unstable, and the chromosome is present. In this study, the stability of CM3354 in nuclear fission and the activity of type II DNA in nuclear fission were studied. That is to say, the introduction of multiple genes into the chromosome, the induction of multiple genes into the chromosome, and the induction of multiple genes into the chromosome. dg-dh alignment, stabilization activity, top2 temperature sensitivity, and instability. The interaction between the dg-dh alignment and the top2 sequence is shown in the table. Dg-dh alignment stabilization activity analysis and activity analysis within 1kb of the dh alignment. CM3354 is stable, and the temperature sensitivity is different. The activity is different. The temperature sensitivity is different. The temperature is different. The The interaction between the two molecules is new. A sudden change in the state of affairs, CM3354, and the disappearance of a part of the state of affairs Sta3 gene is unstable, the presence of chromosomes, and the presence of cytokines. The possibility of DNA analysis, DNA sequencing and spindle body composition is also discussed.