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マウスSLPI遺伝子のクローニングによる気道蛋白分解酵素阻害物質の機能の解析

克隆小鼠SLPI基因分析气道蛋白酶抑制剂的功能

基本信息

批准号：
06670601
负责人：
阿部達也
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスのsecretory leukoprotease inhibitor(SLPI)遺伝子のクローニングのために、まずマウスSLPIのcDNAのクローニングを試みた。臓器はヒトでSLPIの遺伝子が発現していることがすでに知られている肺を選択した。スクリーニングするマウス肺cDNAライブラリーは市販のもの(STRATAGENE社製)を用いた。スクリーニングを始めるにあたり、用いるプローブを次の方法で決定した。Balb/c系雄性マウス(週齢4週)の肺からpoly(A)^+RNAを抽出し、現有のヒトSLPIcDNA、またはブタSLPIcDNAをプローブとしてノーザンハイブリダイゼーションを行なった。この結果、ヒトSLPIcDNAをプローブとしたときは信号を得ず、ブタSLPIcDNAをプローブとしたときのみSLPIのmRNAと推定される約0.7kbの陽性信号を得た。そこで、マウス肺cDNAライブラリーのスクリーニングにはブタSLPIcDNAをプローブとすることに決定した。次いで、ブタSLPIcDNAをプローブとして上記マウス肺cDNAライブラリーから約2.5×10^6個のクローンをスク-ニングしたところ、陽性信号をもつ2個のクローンを得た。これらのクローンの少なくとも1個には約1kbのインサートがあることが確認されたので、このインサートをサブクローニングし、サンガー法による塩基配列の解読を始めている。まだインサート全長にわたる解読は終了しておらず、マウスSLPIcDNAの全長の塩基配列の決定にはいたっていない。

Please check secretory leukoprotease inhibitor (SLPI). This is the first step you need to know. The other is that you need to know how to do this. Please tell me that you need to know that your lungs are not available. You can choose your SLPI. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. I don't know what to do. (STRATAGENE). This is the first time to make a decision using the second method. Balb/c is male, and the lungs are poly (A) ^ + RNA (A). There are several SLPIcDNA, lung, lung, lung and lung. The results showed that the SLPIcDNA signal was not detected, the SLPIcDNA signal was not detected, the SLPI signal was presumed to be positive, and the 0.7kb signal was presumed to be positive. CDNA, lung, lung, In the second session, the SLPIcDNA test was performed on the lungs. The number of cDNA cycles was about 2.5 × 10. The number of cycles in the lungs was about 2.5 × 10, and the sexual signals were successful. There is no agreement between the 1kb and the United States. please make sure that you are not in the market, and that you are not in the market for the first time. The overall length of the information system and the overall length of the SLPIcDNA system are important to determine the performance of the system.