ヒトcyclic ADP-ribose合成酵素(CD38)の遺伝子構造と発現

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申請者らが新しく見出した細胞内情報伝達物質cyclic ADP-ribose(cADPR)は、リンパ球の表面抗原であるCD38により合成される。本研究の目的は、これまで不明であったヒトのcADPR合成酵素(CD38)遺伝子の構造を決定するとともに、cADPR合成酵素遺伝子の発現の組織特異性を明らかにすることである。平成6年度の研究計画は、計画どおりに進行し、以下の様に期待された成果が得られた。1.手術材料で得られたヒト食道組織からgenomic DNAを抽出し、これを用いてヒト遺伝子ライブラリーを作製した。2.申請者らがすでに分離しているヒトcADPR合成酵素のcDNAをプローブに、作製したヒト遺伝子ライブラリーをスクリーニングし、ヒトcADPR合成酵素遺伝子を分離した。3.DAN配列解析システムを用いて、分離したシトcADPR合成酵素遺伝子の塩基配列を決定した。これにより、高等動物のcADPR合成酵素遺伝子の構造が初めて明らかとなった。4.手術材料等から得られたヒトの種々の組織からRNAを抽出し、ヒトcADPR合成酵素cDNAをプローブに用いてノーザンブロット分析を行った結果、cADPR合成酵素遺伝子は調べた全ての組織で発現が認められた。5.分離したヒトcADPR合成酵素遺伝子を蛍光標識し、これをプローブに用いてヒトcADPR合成酵素遺伝子の染色体上の座位をin situハイブリダイゼーション法(FISH法)により決定した。その結果ヒトcADPR合成酵素遺伝子は第4染色体短腕15に座位しており、ハプロイドあたり単一コピーと考えられた。