ショウジョウバエ近縁種のシトクロムP-450遺伝子群の構造解析と発現調節の研究

果蝇相关物种细胞色素P-450基因组的结构分析及表达调控研究

• 批准号: 07640821
• 负责人: 松尾 義則
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07640821/
• 关键词: シトクロムP-450; ショウジョウバエ; 適応進化; 重複遺伝子群; 発現調節; 機能的分化; 遺伝学

生物の適応進化を分子レベルで解明するためには、重複遺伝子群に起こっている遺伝的変化を調べ、遺伝子の機能的分化および発現調節の分化が起こる様子、重複で生じた遺伝子が集団中に広がっていくメカニズムを調べることが重要だと考えられる。そこで本研究は、ショウジョウバエの重複遺伝子群の中で、高度に機能が分化しているシトクロムP-450遺伝子群について、次のような解析をおこなっている。(1)ショウジョウバエ近縁種における遺伝子群の構造遺伝子、発現調節領域および同一種内における遺伝子メンバー間に遺伝的分化や変異がどのくらいみられるか。(2)遺伝子群全体の構成、遺伝子の配置やコピー数等にどのような遺伝的変化がどのくらいあるか。(3)遺伝子群のメンバーの発現調節について遺伝的に分化した違いがどのくらいみられるか。遺伝的な分化がある場合は分化の遺伝情報はどういうところにあるのか。(4)観察された遺伝的違いと個体の適応度にはどのような関係があるか。本年度は、近縁種における遺伝的分化を調べるため、シトクロムP-450遺伝子のCYP6A2をキイロショウジョウバエよりすでにクローン化し、他のショウジョウバエ近縁種よりCYP6A2をクローニングするためのPCRの条件を現在検討している。ショジョウバエ近縁種のゲノムDNAよりPCR法を用いてシトクロムP-450遺伝子を増幅し、クローニングして塩基配列を決定し、遺伝子の構造および種間の遺伝的違いを解析する。遺伝子群全体の構成については、ショウジョウバエのゲノムライブラリーより、シトクロムP-450遺伝子に相同な領域を持つクローンを多数クローニングして解析する計画である。遺伝子のコピーはいくつぐらいあるのか、それぞれの遺伝子の配置はどうなっているのか、これらの遺伝子コピー間にどのような違いがみられ、機能的な分化がどのくらいみられるのか、遺伝子の配置やコピー数に種間で何らかの変化があるかどうかを詳しく調べる。ラムダファージのベクターでは一つのクローンで解析できる範囲が限られるので、より広範に遺伝子群を解析できるP1ファージの系を使って解析することを試みている。現在までに、キイロショウジョウバエのP1ライブラリーより、シトクロムP-450遺伝子群に相同な領域を持つP1クローンが得られたので、これらのクローンについて、遺伝子の配置、制限酵素地図、塩基配列等をさらに詳しく解析している。シトクロムP-450遺伝子群の各遺伝子の発現調節も近縁種間で比較して、どのくらい分化しているかを調べ、発現調節の分化はDNA上のどういう変化で起きているのかをDNA塩基配列の違い等から推測する予定である。

Biological の optimum 応 を molecular evolution レ ベ ル で interpret す る た め に は, repeat but 伝 subgroup に こ っ て い る heritage - を adjustable べ, of 伝 伝 son の function differentiation お よ び 発 now adjust the の が differentiation on こ る others child born, repetitive で じ た heritage 伝 child が set 団 に hiroo が っ て い く メ カ ニ ズ ム を adjustable べ る こ と が important だ と exam え ら れ る. そ こ で は, this study シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ の repeat heritage 伝 で, highly に function in subgroup の が differentiation し て い る シ ト ク ロ ム traces of P - 450 伝 subgroup に つ い て, の よ う な parsing を お こ な っ て い る. (1) シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ about try species に お け る heritage 伝 subgroup の tectonic heritage 伝, 発 now adjust field お よ び within the same に お け る posthumous son 伝 メ ン バ ー に but 伝 differentiation between や - different が ど の く ら い み ら れ る か. (2) heritage 伝 subgroup の configuration of all の composition, but 伝 や コ ピ ー number such as に ど の よ う な heritage 伝 variations of が ど の く ら い あ る か. (3) heritage 伝 subgroup の メ ン バ ー の 発 now adjust に つ い て but 伝 に differentiation し た violations い が ど の く ら い み ら れ る か. The な division of 伝 of cultural heritage がある occasions な division of cultural heritage 伝 information な う う うと うと ろにある う う (4)観 examine the relationship between the <s:1> と individual <s:1> fitness 応 of the された remaining 伝 and the に ような ような ような ような ような ような ような ような がある がある. は this year, nearly try に お け る heritage 伝 differentiation を adjustable べ る た め, シ ト ク ロ ム traces of P - 450 伝 son の CYP6A2 を キ イ ロ シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ よ り す で に ク ロ ー ン し, he の シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ about try species よ り CYP6A2 を ク ロ ー ニ ン グ す る た め の PCR を の conditions now beg し 検 て い る. シ ョ ジ ョ ウ バ エ about try species の ゲ ノ ム DNA よ を り PCR method with い て シ ト ク ロ ム traces of P - 450 伝 を raised し picture, ク ロ ー ニ ン グ し て salt base with column を decided し, but 伝 の tectonic お よ び interspecific の but 伝 violations い を parsing す る. Heritage 伝 subgroup all の constitute に つ い て は, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ の ゲ ノ ム ラ イ ブ ラ リ ー よ り, シ ト ク ロ ム traces of P - 450 伝 son に を な field with same つ ク ロ ー ン を most ク ロ ー ニ ン グ し て parsing す る project で あ る. Posthumous son 伝 の コ ピ ー は い く つ ぐ ら い あ る の か, そ れ ぞ れ の heritage 伝 son の configuration は ど う な っ て い る の か, こ れ ら の heritage 伝 son コ ピ ー between に ど の よ う な violations い が み ら れ, functional differentiation が な ど の く ら い み ら れ る の か, but 伝 の configuration や コ ピ ー number に interspecific で what ら か の variations change が あ る か ど う か を detailed し く adjustable べ る. ラ ム ダ フ ァ ー ジ の ベ ク タ ー で は a つ の ク ロ ー ン で parsing で き る van 囲 が limit ら れ る の で, よ り hiroo van に heritage 伝 subgroup を parsing で き る P1 フ ァ ー ジ の is を make っ て parsing す る こ と を try み て い る. Now ま で に, キ イ ロ シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ の P1 ラ イ ブ ラ リ ー よ り, シ ト ク ロ ム traces of P - 450 伝 subgroup に を な field with same つ P1 ク ロ ー ン が have ら れ た の で, こ れ ら の ク ロ ー ン に つ い て limitations, but 伝 の configuration, enzyme to 図, salt base with column を さ ら に detailed し く parsing し て い る. シ ト ク ロ ム traces of P - 450 伝 subgroup の each legacy 伝 son の 発 it is nearly try adjusting も interspecific で compare し て, ど の く ら い differentiation し て い る か を べ, 発 now adjust the の は differentiation DNA の ど う い う variations change since で き て い る の か を DNA salt base with column の violations い か ら speculation す る designated で あ る.

项目成果

Iwahashi, Kazuhiko: "CYP2E1 and ALDH2 genotypes and alcohol dependence in Japanese." Alcoholism Clin. Exp. Res.19. 564-566 (1995)

Iwahashi、Kazuhiko：“CYP2E1 和 ALDH2 基因型与日本人的酒精依赖。”

Iwahashi, Kazuhiko: "A novel cytochrome P-450IID6(CYPIID6) mutant gene associated with multiple system atrophy" J. Neurol. Neurosurg. Psychiat.58. 263-263 (1995)

Iwahashi, Kazuhiko：“一种与多系统萎缩相关的新型细胞色素 P-450IID6 (CYPIID6) 突变基因”J. Neurol。

Miyatake, Ryosuke: "CYP2E1 genotypes and serum LAP in Japanese Alcoholics." Life Sciences. 56. 1121-1126 (1995)

Miyatake, Ryosuke：“日本酗酒者中的 CYP2E1 基因型和血清 LAP。”