アフリカツメガエルの単離肺組織を用いた生理活性ペプチドの肺吸収性の評価

使用非洲爪蟾离体肺组织评价生物活性肽的肺部吸收

• 批准号: 07672331
• 负责人: 山本 昌
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672331/
• 关键词: 生理活性ペプチド; インスリン; 経肺吸収; 吸収促進剤; タンパク分解酵素阻害剤; アフリカツメガエル; 膜抵抗; 肺組織

本研究で得られた知見を以下に挙げる。1、雌性アフリカツメガエルから摘出した肺組織をUssing chamberに装着し、donor側からreceptor側へのインスリンの透過量を経時的に測定した。その結果、添加物を併用しないコントロールでのインスリンの累積透過率は0.06%となり、見かけの透過係数(Papp)は5.6×10^<-7>cm/secとなった。次に、インスリンの透過性に及ぼす各種吸収促進剤およびタンパク分解酵素阻害剤(以下、酵素阻害剤)の効果についても検討した。吸収促進剤にはLaurylmaltoside(LM)、Sodium glycocholate(NaGC)、Sodium caprate(NaCap)を、酵素阻害剤にはBacitracin、Soybean trypsine inhibitor(STI)をそれぞれ10mM(STIは10mg/mL)の濃度で用いた。LMを併用した場合、累積透過率およびPappはコントロールの約10倍、8倍と有意な増大を示した。しかし、他の吸収促進剤や酵素阻害剤を併用した場合はコントロールに比べて有意な値の増大は認められなかった。本実験では比較的高濃度のインスリン溶液を用いており、酵素による分解の寄与が小さいため酵素阻害剤併用時に有意な効果が認められなかったものと考えられる。2、吸収促進剤または酵素阻害剤の膜への作用を検討するため、これら添加剤の膜抵抗の変化について検討を行った。添加剤による膜抵抗の減少率は透過促進作用の強さとほぼ同じ順となり、吸収促進剤や酵素阻害剤の作用は膜抵抗の減少と何らかの関係があることが示唆された。以上の結果から、アフリカツメガエル肺組織を用いた本研究は薬物の肺上皮細胞における透過性や添加物の効果を検討する系として有用な手段であることが示唆された。

The results of this study are as follows: 1. The transmission amount of the female's lung tissue was measured at the time of installation, donor side and receptor side. As a result, the cumulative transmittance of the additive mixture was 0.06%, and the transmittance coefficient (Papp) was 5.6×10^<-7>cm/sec. Next, the permeability of the enzyme and the effect of various absorption promoters and enzyme inhibitors (hereinafter referred to as enzyme inhibitors) are discussed. Absorption promoters include Laurylmaloside (LM), Sodium glycolate (NaGC), Sodium caprate(NaCap), enzyme inhibitors include Bacitracin, Soybean trypsin inhibitor(STI), and concentrations of STI 10mg/mL are used. When LM is used together, the cumulative transmittance is about 10 times and 8 times higher than that of the original. In addition, the absorption promoter and enzyme inhibitor are used together to increase the sensitivity of the enzyme. This paper compares the high concentration of enzyme solution with the high concentration of enzyme in the medium, enzyme in the medium and enzyme in the medium. 2. Study on the effect of absorption promoter on the membrane resistance of enzyme inhibitor, and study on the change of membrane resistance of additive The decrease rate of membrane resistance due to additive is related to the enhancement effect of absorption promoter and enzyme inhibitor. The results of the above study show that the permeability and additive effect of the compound on lung epithelial cells are useful for the study.