印環細胞型胃癌に対する抗炎症剤による腫瘍抑制効果の検討

抗炎药对印戒细胞型胃癌的抑癌作用探讨

基本信息

批准号：
16H06749
负责人：
早河翼
金额：
$ 1.75万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2016
资助国家：
日本
起止时间：
2016-08-26 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)印環細胞型胃癌腹膜播種モデルの樹立複数の遺伝子改変マウスの交配によって、腹膜播種を呈するマウスモデルの樹立を試みた。変異型Krasマウス・Tgfbr2ノックアウトマウス・Cdh1ノックアウトマウスを、胃上皮幹細胞特異的Cre発現マウスであるMist1-CreERTマウスと交配させた。タモキシフェンによるCre発現誘導後、胃内に印環細胞を呈する小病変を認めたが、膵臓病変によってマウスは２週間で死亡認め、腹膜播種を呈するには至らなかった。そこで、同マウスの胃オルガノイドを培養し、培養中でCreを発現させたところ、印環細胞型胃癌を有する腫瘍オルガノイドが形成された。この腫瘍オルガノイドを免疫不全マウスに皮下移植すると、皮下組織に印環細胞型胃癌の組織像を呈する腫瘤を形成するのみならず、数ヶ月で腹膜播種を呈した。本モデルは印環細胞型胃癌腹膜播種モデルとして有用であると考えられる。(2)Dclk1-DTRマウスの樹立Dclk1遺伝子を有するBACクローンを用い、Dclk1プロモーター下にDTRを発現するDNAコンストラクトを作成し、BACトランスジェニックマウスを作成した。そのうち１系統は消化管上皮内のTuft cell特異的にDTRを発現していることが確認され、DTの投与によって効率よく除去された。Tuft cell除去後、正常状態の消化管上皮では大きな組織障害は起こらず、細胞増殖等への影響もみられなかった。また、Tuft cellは除去後に速やかに他の幹細胞から再供給された。(3)印環細胞型胃癌に対する抗炎症剤とDclk1アブレーションの効果現在マウスを交配して検討中である。

（1）建立用于标志环细胞型胃癌的腹膜传播模型，我们试图建立一种小鼠模型，该模型通过配合多个遗传改性小鼠来展示腹膜传播。突变的KRAS小鼠，TGFBR2敲除小鼠和CDH1基因敲除小鼠用Miss1-Creert小鼠繁殖，它们表达CRE的小鼠是胃上皮干细胞特异性CRE表达的小鼠。在用他莫昔芬诱导CRE表达后，在胃中观察到一个带有标志环细胞的小病变，但是胰腺病变表明，小鼠在两周内死亡，并且没有实现腹膜传播。因此，当培养同一只小鼠的胃癌并在培养物中表达CRE时，形成了带有标志环细胞型胃癌的肿瘤类器官。当将这种肿瘤类器官皮下植入免疫缺陷小鼠中时，不仅形成了皮下组织中标志性环型胃癌的组织学形象的质量，而且在几个月内也会出现腹膜传播。该模型被认为是标志性环型胃癌的腹膜传播模型。（2）建立DCLK1-DTR小鼠携带DCLK1基因的BAC克隆用于在DCLK1启动子下创建表达DTR的DNA构建体，并创建了BAC转基因小鼠。这些菌株之一被证实在胃肠道上皮中特别表达DTR，并通过施用DT有效去除。去除簇细胞后，在正常的胃肠道上皮中未发生重大组织损伤，并且未观察到对细胞增殖的影响。此外，去除后，将簇细胞从其他干细胞中迅速富含。（3）抗炎剂和DCLK1消融对标志环细胞型胃癌的影响我们目前正在经历小鼠的杂交。