bHLH転写因子ネットワークによる恒常的オートファジー活性化機構の解明

bHLH转录因子网络阐明组成型自噬激活机制

• 批准号: 16H06938
• 负责人: 中村 修平
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-08-26 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16H06938/
• 关键词: オートファジー; 老化; 転写因子; 分子生物学; 細胞生物学

申請者は以前の線虫を用いた解析により、寿命延長に必須な恒常的オートファジーを制御する新規のbHLH転写因子複合体MML-1/MXL-2を同定した。MML-1/MXL-2はオートファジー、リソソーム生合成のマスター因子であるHLH-30と相互に活性を促進しつつ協調的にオートファジー関連因子の発現制御を行っていることが明らかとなった(Nakamura et al., Nat. Commun., 2016)。本研究ではこれら線虫で得られた知見が哺乳類において保存されているかを哺乳類培養細胞を用いた分子生物学的、細胞生物学的、生化学的な手法により明らかにし、哺乳類での健康寿命促進のための分子基盤の理解へ貢献することを目指す。本年度は線虫で同定した新規寿命制御因子MML-1とHLH-30のそれぞれのホモログであるMondoおよびTFEBの哺乳類での機能解析に着手した。まずMondoの各種培養細胞における発現、ノックダウンの系を確立し、オートファジー活性への影響を解析した。さらにRPE1細胞やTIG3細胞を用いた早期老化誘導実験系を新規に導入し、細胞老化過程でのSASP(Senescence-associated secretory phenotype＝細胞老化に関連した分泌現象)分泌におけるMondoの機能も同時に調べている。またこの細胞老化過程において線虫同様にMondoの発現変化、オートファジー活性変化を確認しており、現在両者の間の因果関係を詳細に解析中である。さらにTFEBのMondoによる制御を調べる過程でオートファジー因子による新規のTFEB調節機構の存在も明らかとなりこの解析も進めている。

The applicant shall determine the bHLH writing factor complex MML-1/MXL-2 in accordance with the requirements of the previous application. MML-1/MXL-2 is a hybrid of HLH-30 and HLH-30. The interaction between HLH-30 and MML-1 and MXL-2 promotes the interaction between HLH-30 and HLH-30. The interaction between HLH-30 and MML-1 and MXL-2 promotes the interaction between HLH-30 and MML-1. Nat. Commun., 2016)。This study is aimed at understanding the molecular basis of mammalian health promotion by molecular biological, cell biological and biochemical approaches to mammalian cell culture. This year, the new life control factors MML-1 and HLH-30 were set for mammalian functional analysis. Mondo's various cell cultures were developed, their systems were established, and their effects on cell viability were analyzed. In addition, RPE1 and TIG3 cells are used to induce early aging, introduce new regulations, and regulate the secretion of Mondo during cell aging (SASP). This process of cell aging is related to the development and activation of Mondo, and the causal relationship between them is being analyzed in detail. The TFEB Mondo Control System is a new regulatory mechanism for TFEB.

项目成果

Phospholipids in Autophagosome Formation and Fusion.

• DOI: 10.1016/j.jmb.2016.10.029
• 发表时间: 2016-10-27
• 期刊: Journal of molecular biology
• 影响因子: 5.6
• 作者: Martens S;Nakamura S;Yoshimori T
• 通讯作者: Yoshimori T

LIN-28 balances longevity and germline stem cell number in Caenorhabditis elegans through let-7/AKT/DAF-16 axis.

LIN-28 通过 let-7/AKT/DAF-16 轴平衡秀丽隐杆线虫的寿命和生殖干细胞数量。

• DOI: 10.1111/acel.12539
• 发表时间: 2017-02
• 期刊: Aging cell
• 影响因子: 7.8
• 作者: Wang D;Hou L;Nakamura S;Su M;Li F;Chen W;Yan Y;Green CD;Chen D;Zhang H;Antebi A;Han JJ
• 通讯作者: Han JJ