脂質過酸化反応が落花生アレルゲンのアレルゲン性に与える影響についての解析

脂质过氧化对花生过敏原致敏性的影响分析

基本信息

批准号：
18H05998
负责人：
戸田雅子
金额：
$ 1.91万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-08-24 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18H05998/
关键词：
落花生アレルギ－脂質過酸化反応食物アレルギー

项目摘要

本研究では、脂質過酸化反応が落花生主要アレルゲンAra h 1のアレルゲン性に与える影響について解析した。まずは未処理の落花生、落花生オイルを加えて煎ることで脂質過酸化反応を誘導した落花生、オイルなしの加熱処理を行った落花生のタンパク質抽出物を調製した。さらに未処理の落花生からAra h 1を単離して、脂質過酸化反応の代表的な反応産物である2-ヘパノ－ル（2HP）や4-ヒドロキシノネナール（4HN）で修飾した。これらのサンプルのIgE反応性をwestern blottingやELISAにより解析した。落花生アレルギ－患者由来血清を用いたwestern blottingにおいては、加熱処理や2HPや4HNでの修飾によってAra h 1の二量体や三量体の形成が観察された。ELISA解析においては、サンプル間でIgE反応性の顕著な差は認められなかった。さらにサンプルの自然免疫活性化能をヒト単球由来樹状細胞を用いて解析した。未処理の落花生由来タンパク質抽出物やAra h 1による刺激により、樹状細胞における細胞表面マ－カ－（CD40やCD86、HLA-DR分子）の発現増強やサイトカイン（IL-6やTNF-α）の産生が誘導された。加熱処理をした落花生由来タンパク質抽出物や2HPや4HNにより修飾されたAra h 1も同様に樹状細胞を活性化した。一方で、糖鎖を持たないAra h 1組替え体は樹状細胞の活性化を誘導しなかった。以上から（1）落花生主要アレルゲンAra h 1の糖鎖が自然免疫活性化能に関わること、（2）脂質過酸化反応はAra h 1の自然免疫活性化能やIgE反応性、ひいてはアレルゲン性に影響を及さないことが示唆された。本研究で得られた知見は落花生アレルゲンの分子特性を明らかにするものであり、落花生アレルギ－発症のメカニズム解明に貢献する。

在这项研究中，我们分析了脂质过氧化对花生中主要过敏原H1过敏性的影响。首先，我们制备了未处理的花生的蛋白质提取物，通过添加花生油和烘烤来诱导脂质过氧化反应的花生以及没有油加热的花生。此外，从未处理的花生中分离出Ara H 1，并用2-甲醇（2HP）和4-羟基诺纳尔（4HN）进行了修饰，它们是脂质过氧化的代表性反应产物。通过Western印迹和ELISA分析了这些样品的IgE反应性。在使用花生过敏患者的血清蛋白质印迹中，通过加热处理和2HP或4HN的修饰观察到ARA H 1的二聚体和三聚体的形成。在ELISA分析中，样品之间没有观察到IgE反应性的显着差异。此外，使用人单核细胞衍生的树突状细胞分析样品的先天免疫活化潜力。未经处理的花生衍生的蛋白提取物和ARA H1刺激诱导了树突状细胞中细胞表面标记（CD40，CD86，HLA-DR分子）的表达增强和细胞因子（IL-6和TNF-α）的产生。热处理的花生衍生的蛋白质提取物和ARA H1用2HP修饰，4HN类似地活化的树突状细胞。另一方面，不拥有糖的ARA H1重组剂不会诱导树突状细胞的激活。这些结果表明（1）ARA H 1的糖链是花生的主要过敏原，参与激活先天免疫系统的能力，以及（2）脂质过氧化反应不影响ARA H 1的先天免疫激活能力激活IgE，从而激活IgE，从而激活ARA H 1。在这项研究中获得的发现揭示了花生过敏原的分子特性，并有助于阐明花生过敏的机制。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Intrinsic allergenicity of Ara h 1, the major peanut allergen, is not altered by lipid peroxidation

主要花生过敏原 Ara h 1 的内在过敏原性不会因脂质过氧化而改变

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Nozimi Shatari;Maren Krause;Martin Globisch;Thomas Henle;Stefan Vieths;Stephan Scheurer;Masako Toda
通讯作者：
Masako Toda

ドレスデン工科大学/ドイツ保健省ポ－ル・エ－リッヒ研究所(ドイツ)

德累斯顿工业大学/德国卫生部保罗·埃利希研究所（德国）

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Mechanism for the intrinsic allergenicity of Ara h 1, a major peanut allergen, exerting activation of human primary macrophages

主要花生过敏原 Ara h 1 的内在过敏性机制，激活人类初级巨噬细胞

DOI：
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
0
作者：
Masako Toda;Maren Krause;Peter Crauwels;Martin Globisch;Thomas Henle;Ger van Zandbergen;Stefan Vieths;Stephan Scheurer
通讯作者：
Stephan Scheurer