生体内脂質過酸化反応モニタ-システムの開発

体内脂质过氧化反应监测系统的研制

基本信息

  • 批准号:
    01540476
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.02万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1989
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1989 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

生体内フリ-ラジカル反応によって誘起される脂質過酸化を計測することを目的として、低密度リポタンパク質(LDL)の過酸化によって生成する数倍体検出システムを開発し、さらには生体試料中のフリ-ラジカル(活性酸素ラジカル)を直接検出するために、5.5-ジメチル-1-ピロリン-N-オキシド(DMPO)のニトロキシドラジカル生成機構の詳細な解析を行った。前者については、サイズ排除クロマトグラフィ-によってヒト血清中のリポタンパク質を分離した後、これらのカラム後方に接続したバイオリアクタ-でこれを分解し、生成する過酸化水素をオンラインで発色して検出することによって目的を達成した。バイオリアクタ-は、ホスホリパ-ゼDとコリンオキシダ-ゼをグルタルアルデヒドニ量体によってサイズ排除クロマトグラフィ-用カラム充填剤に同時固定化することで調製した。結果、LDL数倍体がLDLより前に溶出することを明らかにした。後者については、特に2価あるいは3価の鉄イオンが存在する場合にDMPOから生成する電子スピン共鳴法で検出可能なニトロキシドラジカルの生成反応についての詳細な検討を行った。この結果、DMPOをトラップ剤として用いて生体試料から得られるESRシグナルのうちのいくつかは、DMPOと3価の鉄の錯体形成を経由してDMPOから生成する酸化物の更に酸化された誘導体によるものであること、またヒドロキシルラジカルとDMPOとの反応で生成されると今日まで信じられてきたDMPO-OHアダクトが、上記の錯体形成したDMPOへの水の求核付加反応によっても生成することを明らかにし、生体試料中のフリ-ラジカル検出へのDMPOをトラップ剤としたスピントラッピングの使用の基礎を確立した。
In vivo lipid peroxidation induced by low density lipoprotein (LDL) was measured in vivo. In vivo lipid peroxidation induced by low density lipoprotein (LDL) was measured in vivo. Detailed analysis of the mechanism for the generation of active acid molecules by direct detection, 5.5-channel-1-channel-N-channel (DMPO). The former aims to achieve the goal of decomposing and generating hyperacidified water, color development and detection after the separation of serum and protein. In addition, the system can be used to adjust the timing of the system. Results: LDL several times before dissolution The latter is the case where the iron element of the third element exists, and the electron resonance method of DMPO generation is used to detect the possibility of the generation of the iron element of the third element. The results showed that the ESR of DMPO and DMPO in biological samples was reduced, and the iron complex formation of DMPO and DMPO was reduced. The acid complex formation of DMPO and DMPO was reduced, and the acid complex formation of DMPO and DMPO was reduced. In this paper, the author points out that the basis of the application of DMPO in biological samples is established.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
牧野圭祐: "An artifact in the ESR spectrum obtained by spin trapping with DMPO" Free Radical Research Communications. 6. 19-28 (1989)
Keisuke Makino:“通过 DMPO 自旋捕获获得的 ESR 光谱中的伪影”Free Radical Research Communications,6. 19-28 (1989)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
牧野圭祐: "Fundamental aspects of spin trapping with DMPO" Radiation Physics and Chemistry. (1990)
Keisuke Makino:“DMPO 自旋捕获的基本原理”《辐射物理与化学》(1990)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
牧野圭祐: "生体内フリ-ラジカルのスピントラッピング法" 化学と生物. 27. 529-532 (1989)
Keisuke Makino:“体内自由基自旋捕获方法”化学与生物学 27. 529-532 (1989)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
牧野圭祐: "ESRとフリ-ラジカル" 日本医学館, 9 (1989)
Keisuke Makino:“ESR 和自由基”日本医学博物馆,9 (1989)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
牧野圭祐: "Separation of proteins on hydroxyapatite columns" Journal of Chromatographic Science. 27. 659-664 (1989)
Keisuke Makino:“羟基磷灰石柱上的蛋白质分离”《色谱科学杂志》27. 659-664 (1989)。
  • DOI:
  • 发表时间:
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