ナス科植物が果実にグルタミン酸を高蓄積する分子機構の解明
阐明茄科植物在果实中积累高水平谷氨酸的分子机制
基本信息
- 批准号:21880027
- 负责人:
- 金额:$ 0.75万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2010
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究の目的は、ナス科植物の果実にグルタミン酸が高蓄積するメカニズムを明らかにすることである。トマトの緑熟果実にはGABAが高蓄積し、赤熟期に入ると急速に代謝される。その一方で、グルタミン酸は赤熟期に高蓄積することが知られている。本研究ではGABAからグルタミン酸を合成する酵素(GABAアミノ基転移酵素;GABA-TK)がこの現象に深く関与していと考え、GABA-TKタンパク質をゲノム情報が整備されたイネから単離することとした。まず一年中利用可能な材料である杯盤由来のイネカルスを、実験材料として用いることが可能であるかについて調査を行った。その結果、トマトの約1/100程度ではあるが酵素活性が存在することが分かった。続いて、GABA-TK活性が最も高い培養条件を明らかにする目的で、カルス中のGABA含有量の変化を継時的に調査した。その結果、継代後5日目にGABAが急速に代謝されることが分かった。この結果から、経代後5日目のカルスを初発材料にし、GABA-TKタンパク質を精製することが最適であると判断した。GABA-TKの酵素活性を指標として、硫安沈殿、陰イオン交換クロマトグラフィー、脱塩、バッファー交換、限外濾過の条件検討を行った。この条件検討と並行して、GABA-TK酵素活性の測定方法の高感度化についても検討を行った。これまでは、GABA-TKの反応産物であるグルタミン酸をグルタミン酸脱水素酵素で分解し生成するNADH量を蛍光分光光度計で測定していた。この方法は感度は高いがバックグラウンドが高く、特異性も低い。そこで、グルタミン酸を蛍光標識物質NDFで標識した後、超高速液体クロマトグラフィーを使って分離し、蛍光分光高度計で検出する方法の構築を行った。その結果、100fmol程度のグルタミン酸を測定することができる実験系の構築に成功した。
The purpose of this study was to investigate the high accumulation of acid in fruits of plants of different families. GABA accumulation is high in green ripening fruit, and rapid metabolism occurs in red ripening fruit. The accumulation of acid in the ripening period is high. In this study, we investigated the relationship between GABA gene synthesis enzyme (GABA-TK) and GABA-TK gene synthesis. In the course of a year, the use of possible materials, the origin of the dish, the production of materials, the use of materials, the possibility of investigation, etc. About 1/100th of the enzyme activity exists. In addition, GABA-TK activity was investigated under different culture conditions, and the change of GABA content in culture medium was investigated. 5 days later, GABA was rapidly metabolized. 5 days after the initial development of the material, GABA-TK was refined, and the results were judged to be optimal. The enzyme activity of GABA-TK was evaluated by enzyme activity index, enzyme activity index and enzyme activity index. This study was conducted in parallel with the study on the high sensitivity of GABA-TK enzyme activity assay. The amount of NADH produced by enzyme decomposition of GABA-TK was determined by spectrophotometry. This method has high sensitivity and low specificity. Construction of a method for separating and detecting ultra-high speed liquid by using NDF as an optical identification substance As a result, the system was successfully constructed by measuring the acid content at 100 fmol.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
秋廣 高志其他文献
秋廣 高志的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('秋廣 高志', 18)}}的其他基金
Development of yeast protein expression library expressing all Arabidopsis membrane transporters
表达所有拟南芥膜转运蛋白的酵母蛋白表达文库的开发
- 批准号:
23K05696 - 财政年份:2023
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
相似海外基金
グルタミン酸・GABA共放出シナプスで両神経伝達物質は同じ小胞に充填されるか?
两种神经递质是否被包装在谷氨酸/GABA 共同释放突触处的同一个囊泡中?
- 批准号:
23K18167 - 财政年份:2023
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
グルタミン酸作動性・GABA作動性入力による視床下核ニューロンの活動調節様式
谷氨酸能和 GABA 能输入调节丘脑底核神经元活动
- 批准号:
20K07772 - 财政年份:2020
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
中枢シナプスにおけるグルタミン酸とGABA共放出の可塑性とその役割
中央突触谷氨酸和GABA共释放的可塑性及其作用
- 批准号:
20H03358 - 财政年份:2020
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
3T-MRSを用いたアルコール依存症患者のGABA、グルタミン酸異常に関する研究
使用 3T-MRS 研究酒精患者的 GABA 和谷氨酸异常
- 批准号:
21791123 - 财政年份:2009
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
グルタミン酸輸送蛋白によるGABA機能修飾過程とてんかん原性獲得の分子機構の解明
阐明GABA功能修饰过程的分子机制并通过谷氨酸转运蛋白获得致痫性
- 批准号:
18790840 - 财政年份:2007
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
代謝型グルタミン酸・GABA受容体の相互連関とメタ・シナプス可塑
代谢型谷氨酸和 GABA 受体与元突触可塑性之间的相互关系
- 批准号:
19045019 - 财政年份:2007
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
非侵襲的脳内グルタミン酸・GABA測定により統合失調症アミノ酸仮説の検討
使用大脑中谷氨酸和 GABA 的非侵入性测量来检验精神分裂症氨基酸假说
- 批准号:
17025029 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
海馬シナプスにおけるグルタミン酸・GABA共放出のメカニズム
海马突触谷氨酸和 GABA 共释放的机制
- 批准号:
17023002 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
AMPA型グルタミン酸受容体で仲介される小脳GABAシナプス前抑制の分子基盤
AMPA型谷氨酸受体介导的小脑GABA突触前抑制的分子基础
- 批准号:
16015324 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
グルタミン酸作動性ニューロン・GABA作動性ニューロン分化機構の解析
谷氨酸能神经元/GABA能神经元分化机制分析
- 批准号:
02J20135 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 0.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows