イモリ切断損傷脊髄の完全再生を担う再生細胞の分化多能性と組織再構築能の検証

验证负责蝾螈截肢损伤脊髓完全再生的再生细胞的多能性和组织重塑能力

• 批准号: 21K20747
• 负责人: 関 亮平
• 金额: $ 2万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-08-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K20747/
• 关键词: 有尾両生類; 脊髄; 再生; 神経幹細胞; ニューロスフィア; 脊髄再生; 脊髄損傷; 分化多能性

本研究課題の目的は、イモリ脊髄損傷後にその再生を担う細胞(以下、再生細胞と呼ぶ)の分離培養法を開発することと、再生細胞の分化多能性の維持や組織再構築能の発揮に係る細胞内シグナル経路や接着分子を明らかにすることである。当該年度は、まず前年度の成果についての論文を執筆し、投稿・公表した。当該論文の内容は、イベリアトゲイモリの中枢神経系組織から神経幹細胞を回収し培養する方法を確立した、というものである。具体的には、マウス等の哺乳類における神経幹細胞の一般的な培養法（ニューロスフィア法）をアレンジした手法を用いることで、イモリの脳と脊髄に由来する細胞からもニューロスフィア様の細胞塊が形成されることを示した。さらに、その細胞塊を構成する細胞が神経幹細胞のマーカータンパク質を発現することと、ニューロンやグリア細胞へと分化することを明らかにし、神経幹細胞としての性質を備えていることを示した。現在、幹細胞性をより厳密に証明するために、得られた細胞塊（ニューロスフィア）の継代培養を行い、繰り返し継代したあとでも未分化性と分化多能性が維持されるか検証中である。加えて、当初の計画を変更し、脊髄を再生できるイモリと再生できないマウスの神経幹細胞の遺伝子発現プロファイルの比較解析を行うこととした。これにより、イモリ特異的に高発現している遺伝子や活性化しているシグナル経路を見つけ出し、さらに再生能力との関連を実験的に示すことが狙いである。現在までに、上記方法で培養したイモリ由来のニューロスフィアと、マウス由来のニューロスフィアからtotal RNAを抽出し、RNA-seqを実施した。現在、シークエンス結果のデータ解析を実施している最中である。

本研究主题的目的是开发一种方法，用于分离和培养纽特脊髓损伤后负责再生的细胞（以下称为再生细胞），并阐明细胞内信号途径和粘附分子，这些分子和粘附分子保持维持多元性质的性质性质的多元性质，并施加了再生性细胞的重新结构能力。在这个财政年度，我们首先撰写了一篇有关上一年结果的论文，并提交并发布了它。本文的内容指出，已经建立了一种从伊比利亚蜘蛛网中枢神经系统组织收集和培养神经干细胞的方法。具体而言，我们已经表明，通过使用以哺乳动物（如小鼠）的神经干细胞的一般培养方法（神经圈方法）排列的方法，是由源自NEW的大脑和NEW的细胞形成的神经圈样细胞肿块。此外，揭示了组成细胞质量的细胞表达神经干细胞的标记蛋白并分化为神经元和神经胶质细胞，表明它们具有神经干细胞的特性。更精确地证明了干细胞的特性，我们目前正在进行所获得的细胞质量（神经球）的亚培养物，并验证即使经过重复经过后，即使可以保持未分化和分化的多能估计。此外，最初的计划进行了更改，以对Newt的神经干细胞的基因表达谱进行比较分析，这些神经干细胞可以再生无法再生的脊髓和小鼠。这旨在检测在NEWT和激活的信号途径中高度表达的基因，并进一步实验证明它们与再生能力的关联。迄今为止，从使用上述方法培养的小鼠衍生的NewT和神经球中提取了总RNA，并进行了RNA-Seq。我们目前正在进行序列结果的数据分析。

项目成果

miR-505はSTAT3/AUF1経路を介してグリオーマ幹細胞の腫瘍形成能を制御する

miR-505通过STAT3/AUF1通路调节神经胶质瘤干细胞的致瘤潜力

• 发表时间: 2023
• 作者: 大江総一;柿崎梨緒;阪本純加;佐藤輝英;林真一;小池太郎;関亮平;中野洋輔;北田容章
• 通讯作者: 北田容章

Establishment of neural stem cell culture from the central nervous system of the Iberian ribbed newt Pleurodeles waltl

• DOI: 10.1111/dgd.12820
• 发表时间: 2022-10
• 期刊: Development
• 影响因子: 4.6
• 作者: Ryohei Seki-Omura;S. Hayashi;Souichi Oe;T. Koike;Y. Nakano;Y. Hirahara;Susumu Tanaka;M. Kitada

イベリアトゲイモリ中枢神経系由来の神経幹細胞の培養法

伊比利亚网纹动物中枢神经系统源性神经干细胞的培养方法

• 发表时间: 2023
• 作者: 関亮平;林真一;大江総一;小池太郎;中野洋輔;平原幸恵;田中進;北田容章
• 通讯作者: 北田容章

末梢神経におけるスルファチド分子種の挙動と作用機序の検討

硫苷脂分子种类在周围神经中的行为和作用机制的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 蒲生恵三;平原幸恵;小池太郎;大江総一;田中進;林真一;関亮平;中野洋輔;小野勝彦;北田容章
• 通讯作者: 北田容章

マウス一次感覚ニューロンにおけるCD34陽性ニューロンの同定

小鼠初级感觉神经元中 CD34 阳性神经元的鉴定

• 发表时间: 2023
• 作者: 小池太郎;大江総一;林真一;関亮平;中野洋輔;北田容章
• 通讯作者: 北田容章