高活性な免疫誘導を実現する多機能集積型ナノワクチンシステムの構築

构建实现高活性免疫诱导的多功能一体化纳米疫苗系统

基本信息

批准号：
22800055
负责人：
弓場英司
金额：
$ 2.01万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、多糖を主鎖骨格とするpH応答性高分子とリポソームを複合化したpH応答性リポソームに着目し、その高分子構造を最適化することで、免疫システムを効率良く活性化できるシステムについて検討を行った。デキストランにpH応答性基及び長鎖アルキル鎖を導入することで、生体適合性の高い主鎖骨格を有するpH応答性高分子を合成した。この高分子を修飾したリポソームは、そのpH応答性基の導入率の増加に伴い、より微弱酸性領域で脂質膜を不安定化し、封入したモデル薬物を放出することができた。これらのリポソームにモデルタンパク質・オブアルブミン(OVA)を内包し、DC2.4細胞に取りこませたところ、pH応答性多糖を修飾したリポソームはDC2.4細胞の細胞質中にOVAを効果的に運搬した。細胞による取り込み量はpH応答性基の導入率の高い多糖修飾リポソームほど高かった。これらのリポソームを、OVAを抗原として発現するE.G7-OVA細胞を播種し腫瘍を形成させたC57BL/6マウスの背部皮下に投与したところ、pH応答性多糖を修飾していないリポソームを投与したマウスでは、腫瘍が未処理群と同様に成長したが、pH応答性多糖を修飾したリポソームを投与したマウスでは、腫瘍が縮小し、一部では完全に消失したマウスも見られた。これは、pH応答性多糖を修飾したリポソームが、皮下の免疫担当細胞に取り込まれた後、細胞内の酸性小胞において不安定化し、内封したOVAを細胞質に導入した結果、抗腫瘍免疫を強力に誘導したためであると考えられる。このように、本年度は新規なpH応答性多糖を合成し、これをリポソームと複合化させることで、免疫担当細胞内に効率良く抗原タンパク質を導入し、強力な抗腫瘍免疫を誘起できる高性能pH応答性リポソームを構築することに成功した。

今年，我们专注于pH响应性脂质体，这些脂质体将脂质体与pH响应性聚合物与多糖作为主链骨架，并检查了可以通过优化聚合物结构来有效激活免疫系统的系统。通过将pH响应组和长链烷基链引入葡聚糖，合成了具有高度生物相容性主链主链的pH响应性聚合物。随着pH响应组的引入速率增加，脂质体不稳定弱酸性区域的脂质膜，从而使脂质体释放了封装的模型药物。这些脂质体含有卵蛋白（OVA）的模型蛋白，并在DC2.4细胞中摄入，用pH反应性多糖有效地将卵子运送到DC2.4细胞的细胞质中。细胞的摄取量较高，在多糖改性脂质体中，引入了pH响应组的速率高。当这些脂质体被皮下在背侧皮下施用时，在C57BL/6小鼠中，在C57BL/6小鼠中施用了用E.G7-ova细胞播种的E.G7-OVA细胞，表达OVA为抗原，肿瘤在没有修饰的pH响应性多糖中的小鼠中生长，但在未经处理过的小组中，该肿瘤曾经被过时，但该肿瘤曾经被过时，该小鼠曾经被过度使用过，这些肿瘤曾经被过度施用。 pH反应性多糖，肿瘤收缩，一些小鼠完全消失。这被认为是因为用pH响应性多糖修饰的脂质体被皮下免疫反应细胞吸收，在细胞内的酸性囊泡中不稳定，并将封装的OVA引入细胞质中，从而导致强大的抗肿瘤免疫力。因此，今年，通过合成一种新型的pH响应性多糖并将其与脂质体结合，我们成功地构建了高性能的pH值脂质体，可以有效地将抗原蛋白引入免疫反应细胞中，并诱导强大的抗原免疫免疫。