PSD-95パルミトイル化酵素DHHC2によるシナプス形成機構の解明

PSD-95 棕榈酰化酶 DHHC2 阐明突触形成机制

• 批准号: 22890234
• 负责人: 則竹 淳
• 金额: $ 2.01万
• 依托单位: National Institute for Physiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22890234/
• 关键词: パルミトイル化脂質修飾; DHHC2; PSD-95; シナプス; 神経活動; ポストシナプス膜; AMPA型グルタミン酸受容体

本研究の目的はポストシナプス膜近傍で機能するPSD-95パルミトイル化酵素、DHHC2に焦点をあて、その活性がどのような情報伝達機構により制御され、シナプス形成に関与しているか明らかにすることを目的としていた。研究実施計画としては、まず、DHHC2の活性制御因子の同定を独自に開発したタンデムタグ融合膜蛋白質を精製するシステムを応用し、ラット脳画分から免疫沈降法を用いて探索した。質量分析法の結果、数種類のDHHC2の結合蛋白質を同定し、機能解析をはじめていた。また、細胞生物学的手法を用いてDHHC2の局在の制御機構を検討するために、細胞表面に発現するようなDHHC2のコンストラクトを作製すると、DHHC2が細胞表面で局在することが明らかとなり、パルミトイル化酵素が細胞膜表面に局在することを初めて観察し、この細胞表面に発現したDHHC2が神経活動に依存して変化しうるか解析を進めた。上記の実験により、パルミトイル化脂質修飾酵素群の一つDHHC2が神経活動に依存的にどのようにシナプス形成に関与するかアプローチし、論文投稿まで行ったが、一身上の都合により、職を辞したため、研究の中止を申請し承認後、未使用の補助金を返還することとなった。

The purpose of this study is to investigate the relationship between PSD-95 and enzyme activity, DHHC2 activity, and information transmission mechanism. The study was conducted to explore the application of immunosedimentation in the purification of fusion membrane protein by using the method of enzyme digestion and enzyme digestion. Results of mass spectrometry, identification of several DHHC2 binding proteins, and functional analysis Cell biological methods are used to investigate DHHC2 's regulatory mechanism, cell surface development, DHHC2 's regulatory mechanism, DHHC's regulatory mechanism, DHHC's regulatory mechanism, DH In this paper, the author notes that DHHC2 is a kind of lipid modifying enzyme group, which is dependent on the activity of the brain.

项目成果

Ndell palmitoylation : a new mean to regulate cytoplasmic dynein activity

Ndell棕榈酰化：调节细胞质动力蛋白活性的新方法

• 发表时间: 2009
• 期刊: EMBO J 29
• 作者: Koike-Kumagai;et al.;Kazuo EMOTO;榎本和生;金森崇浩・榎本和生;榎本和生;Kazuo Emoto;Fukata Y et al;Fukata Y et al;Matsuda N et al;Mill P et al;Shmueli A et al
• 通讯作者: Shmueli A et al

Determinant role of PSD-95-palmitoylacytransferase, DHHC2, in postsynaptic assembly

PSD-95-棕榈酰基转移酶 DHHC2 在突触后组装中的决定性作用

• 发表时间: 2010
• 作者: 下島圭子;他8名;春田雅俊.;則竹淳
• 通讯作者: 則竹淳