哺乳動物の小胞体関連分解における小胞体内イベントの全容解明

彻底阐明哺乳动物内质网相关降解中的内质网事件

• 批准号: 22H00407
• 负责人: 森 和俊
• 金额: $ 27.21万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H00407/
• 关键词: 小胞体関連分解; 構造異常の度合い; オルガネラ

[課題3] a1,6結合マンノース露出のM7Aを認識するレクチンであるOS9とXTP3Bの使い分けについて、研究が大きく進展した。過去の報告では、基本的にはOS9とXTP3Bは共に糖タンパク質の分解を促進するとされている。ただし、糖タンパク質の種類によってはXTP3Bが分解を阻害するとも報告されており、分解促進や抑制の分子メカニズムは未だ明らかにされていない。また、我々は過去に、顕著な異常構造を示す糖タンパク質は糖鎖非依存的経路によっても分解されることを報告している。本年度、OS9遺伝子破壊細胞株、XTP3B遺伝子破壊細胞株、およびOS9/XTP3B二重遺伝子破壊細胞株を用いて、種々の分解基質の分解速度を測定した。その結果、構造異常の度合いが小さい分解基質 (mCD3d-△TM-HA, myc-hATF6a full length, myc-hATF6a-△586-638) の分解はOS9とXTP3Bが共に促進している一方で、顕著な構造異常を示す分解基質においては、OS9のみが必要である分解基質 (NHK, myc-hATF6a-△648-666, myc-hATF6a-△478-487&△549-562) と、XTP3Bが新規合成直後での分解に必要である分解基質 (mCD3d-△TM-HA<33-7aa-34>, mCD3d-△TM-HA<70-7aa-71>に分類されることを明らかにした。よって、糖タンパク質の分解におけるOS9とXTP3Bの必要性の差異は分解基質の構造異常の度合いに依存するとの我々の仮説が支持された。

[状态3]研究在使用OS9和XTP3B，凝集素的使用方面取得了重大进展，这些凝集素识别M7a，并通过暴露于A1,6结合的甘露糖。先前的报道说，OS9和XTP3B基本上都是促进糖蛋白降解。但是，还报道了XTP3B根据糖蛋白的类型抑制降解，并且尚未阐明促进或抑制降解的分子机制。过去，我们还报道说，表现出明显异常结构的糖蛋白也可以通过糖基化非依赖性途径降解。今年，使用OS9基因破坏细胞系，XTP3B基因破坏细胞系和OS9/XTP3B双基因破坏细胞系测量了各种降解底物的降解率。结果，OS9和XTP3B均促进降解底物的降解，其结构异常较小（MCD3D-△TM-HA，MYC-HATF6A全长，Myc-Hatf6a-△586-638），而OS9和XTP3B促进了显着的结构抗体（a） myc-hatf6a-△648-666，myc-hatf6a-△478-487＆△549-562），以及要求XTP3B立即降解的降解底物，在新合成后立即降解（mcd3d-tm-ha <33--Ha <33--7aaa-34>，它都可以找到，它是这样的，它是这样的。 MCD3D-△TM-HA <70-7AA-71>，因此我们的假设得到了支持，即糖蛋白降解中OS9和XTP3B的需求差异取决于降解底物中结构异常的程度。