小胞体膜結合性転写因子ATF6の細胞内ダイナミックス

内质网膜结合转录因子 ATF6 的细胞内动力学

基本信息

  • 批准号:
    14380335
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 10.37万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 2003
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ATF6は、小胞体に埋め込まれた形で恒常的に発現している膜結合性転写因子であり、小胞体ストレス下で小胞体内に高次構造の異常なタンパク質が蓄積するとプロテオリシスを受けて活性化される。つまり、切断されて膜から遊離した細胞質側の転写因子ドメインが核へ移行して主として小胞体シャペロンをコードする遺伝子の転写を促進する。この結果、誘導された小胞体シャペロンの作用により小胞体内の恒常性が維持される。これまでにATF6の切断がセリンプロテアーゼ阻害剤AEBSFにより阻害されることを見いだしていたが、他のグループにより、ATF6はゴルジ装置に存在するS1P(セリンプロテアーゼ)とS2P(メタロプロテアーゼ)による連続的な切断を受けて活性化されることが報告された。これは、ATF6が小胞体ストレスに応答して小胞体からゴルジ装置へ移行することを意味している。また一般に、高次構造の異常なタンパク質は小胞体に留められていると考えられている。そこで、小胞体ストレス下でATF6は異常タンパク質とは選別されて輸送されるのかどうか明らかにするために、まず小胞体ストレスに応答して小胞体からゴルジ装置へ移行するATF6と緑色蛍光タンパク質(GFP)との融合タンパク質GFP-ATF6を作成した。折り畳み状況をモニターする基質として、温度感受性のウィルス糖タンパク質VSV-Gtsを解析した。VSV-Gtsは39℃では折り畳まれないために小胞体内に蓄積するが、32℃にすると折り畳まれてゴルジ装置を経て細胞表面に到達した。このときGFP-ATF6は39℃、32℃ともに小胞体に局在したままであった。39℃から32℃に温度を下げるときに、1mMのジチオスレイトールを投与して小胞体ストレスを与えると、GFP-ATF6は小胞体からゴルジ装置へと輸送されたが、VSV-Gtsの場合は折り畳みが阻害されて、小胞体に留まったままであった。以上の結果から、ATF6と高次構造の異常なタンパク質との選別が確かに行われていることが実証された。今後は、この選別の仕組みを明らかにしていきたいと考えている。
ATF6 is activated by a membrane-binding factor that is constantly present in the microcellular structure and accumulates in the microcellular structure. The expression of cytoplasm-side transcription factors that promote nuclear migration and promote the expression of cytoplasm-side transcription factors that promote nuclear migration and cytoplasm-side transcription. As a result, induction of microcellular changes in the role of microcellular homeostasis is maintained. This is why ATF6 is shut down and blocked by AEBSF. This is why ATF6 is shut down and blocked by AEBSF. This is why ATF6 is shut down and blocked by AEBSF. This is why ATF6 is shut down and blocked by AEBSF. This means that ATF6 cells can be transferred from one cell to another. General, high-order structural anomalies, small cells, etc. ATF6 is made of abnormal material and selective material, and ATF6 is made of green material and selective material. The temperature sensitivity of the substrate and the temperature sensitivity of the substrate are analyzed. VSV-Gts are stored in cells at 39℃ and reach the surface of cells at 32℃. GFP-ATF6 is at 39℃ and 32℃. 39 ° C to 32 ° C temperature, 1mM of the cell temperature and cell temperature, GFP-ATF6 cell temperature and cell transport, VSV-Gts case, cell temperature and cell temperature. The above results show that ATF6 and higher-order structural anomalies can be identified and verified. In the future, the selection of officials will be made in the future.

项目成果

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