疲弊T細胞の幹細胞様メモリー化とがん治療への応用

将耗尽的T细胞转化为干细胞样记忆及其在癌症治疗中的应用

基本信息

批准号：
22K20778
负责人：
安藤眞
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20778/
关键词：
CAR T療法 T細胞疲弊 CAR T細胞療法ステムセルメモリーT細胞疲弊T細胞

项目摘要

T細胞の疲弊化や幹細胞性の喪失は、固形がんに対するChimeric Antigen Receptor (CAR) T細胞療法抵抗性の大きな要因である。当研究室では、核内受容体ファミリーNR4Aが疲弊化の中心となる転写因子であることを報告している。さらに、疲弊CAR T細胞をステムセルメモリー様CAR T細胞へと転換する培養法を確立している。本研究では、CAR T細胞による治療がより困難であるHER2弱陽性がん細胞株を標的に、CRISPR/Cas9によるNR4A欠損もしくはドミナントネガティブNR4A (DN-NR4A) 遺伝子導入によって、HER2 CART細胞の抗腫瘍効果の改善を試みた。In vitro疲弊実験の結果、NR4A欠損もしくはDN-NR4A導入は、サイトカイン産生や増殖能、細胞傷害活性などの抗腫瘍効果の増強、疲弊抵抗性を付与することを明らかとした。さらに、bulk RNA-seqの結果、DN-NR4A導入 CAR T細胞は、細胞増殖やミトコンドリア代謝関連遺伝子の増加が認められた。また、in vivo固形がん治療モデル実験の結果、DN-NR4A導入CAR T細胞では、腫瘍局所において、セントラルメモリーCAR T細胞の選択的な増殖を伴った抗腫瘍効果の増強が認められた。本年度の研究より、DN-NR4A導入は固形がんに対するCAR T細胞の抗腫瘍効果を改善することが明らかとなった。またDN-NR4A導入は、CRISPR/Cas9によるNR4A欠損よりも簡便で細胞へのダメージも最小限に済むため、CAR T細胞の疲弊化を抑制しうる有望な手法であると考えられる。

T细胞疲惫和干细胞丧失是嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗对固体癌症的主要因素。我们的实验室报告说，核受体家族NR4A是疲惫的核心部分的转录因子。此外，已经建立了一种培养方法，以将耗尽的CAR T细胞转化为干细胞记忆样的汽车T细胞。在这项研究中，我们试图通过CRISPR/CAS9的NR4A缺乏症或显性负NR4A（DN-NR4A）基因的转导HER2 CART细胞的抗肿瘤作用，靶向HER2 HER2弱阳性癌细胞系，这些细胞更难用CAR T细胞治疗。由于体外疲劳实验的结果，发现NR4A缺乏症或DN-NR4A引入赋予了增强的抗肿瘤作用，例如细胞因子的产生，增殖能力和细胞毒性活性以及疲劳性抗性。此外，由于大量RNA-Seq，DN-NR4A转导的CAR T细胞显示出细胞增殖和线粒体代谢相关的基因的增加。此外，由于体内固体癌症治疗模型的结果，DN-NR4A转导的CAR T细胞表现出增强的抗肿瘤作用，并伴随着肿瘤部位的中枢记忆T细胞的选择性增殖。今年的研究表明，DN-NR4A引入改善了CAR T细胞对固体癌的抗肿瘤作用。此外，DN-NR4A引入比CRISPR/CAS9引起的NR4A缺陷更方便，并最大程度地减少了细胞损伤，这使其成为一种有希望的技术，可以抑制Car T细胞的衰竭。