血管肉腫におけるTGF-βシグナル伝達の解明と新規治療法の探索

阐明血管肉瘤中的 TGF-β 信号传导并寻找新的治疗方法

• 批准号: 22K20796
• 负责人: 坂元 亮子
• 金额: $ 1.33万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20796/
• 关键词: 血管肉腫; TGFーβシグナル; 内皮間葉移行

本研究の目的は、血管肉腫に対する病態をTGF-βシグナル伝達経路の視点から解明し、発癌・癌浸潤・癌転移における作用機構の解明およびそこから導かれる新規治療法の可能性を探索することである。そこで、まず、血管肉腫におけるTGF-βシグナル伝達経路に関連する各種分子の発現レベルを解析するために、正常血管内皮細胞と血管肉腫細胞株を培養し、TGF-βタイプII受容体とALK1およびALK5、核内に蓄積して遺伝子転写反応を調節するSmad１/５とSmad２/３のリン酸化のイムノブロッティングを行った。結果、それぞれの細胞株におけるSmad１/５とSmad２/３のリン酸化に有意な差はなかったが、TGF-βタイプII受容体とALK1およびALK5の両方のレベルは、正常血管内皮細胞と比較して血管肉腫細胞株で有意に増加していた。In vitroでの発現の増加を認めたため、次にin vivoにおける発現レベルを解析することにした。現在、臨床症状、ステージ、予後をリスト化した血管肉腫患者組織と正常血管や老人性血管腫の組織を免疫染色している最中である。その免疫染色の結果をもとに転移や予後と相関するか検討する予定である。同時に、活性型TGF-βと受容体との相互関係の検討するため、正常血管内皮細胞と血管肉腫細胞株における培養液中のTGF-βのレベルを測定した。結果、正常血管内皮細胞より血管肉腫細胞株において、 培養液中のTGF-βのレベル低下を認めた。次に、TGF-βの影響を調べるため、TGF-βを細胞に添加し、TGF-βタイプII受容体とALK1およびALK5のイムノブロッティングを行う予定だが、試薬の供給が間に合わず、待機の状態である。

は の purpose this study, blood vessels, the meat is swollen に す seaborne る pathological を TGF - beta シ グ ナ ル 伝 の viewpoint of 経 road か ら interpret し, 発 carcinoma, carcinoma infiltration, planning to move に お け る role institutions の interpret お よ び そ こ か ら guide か れ る を の possibility to explore new rules therapy す る こ と で あ る. そ こ で, ま ず, blood vessels, the meat is swollen に お け る TGF - beta シ グ ナ ル 伝 da 経 road に masato even す る various molecular の 発 now レ ベ ル を parsing す る た め に, normal と vascular endothelial cells swollen cell lines を し, TGF - beta タ イ プ II by let body と ALK1 お よ び ALK5, nuclear accumulation of に in し て heritage 伝 son planning to write an 応 を adjust す る Sm ad1/5とSmad2/3 <s:1> リ <s:1> acidification <s:1> ムノブロッティ ムノブロッティ グを グを line った. Results, そ れ ぞ れ の cell lines に お け る Smad1/5 と Smad2/3 の リ ン acidification に intentionally な poor は な か っ た が, TGF - beta タ イ プ II by let body と ALK1 お よ び ALK5 の struck party の レ ベ ル は と comparison, normal endothelial cells し て vascular meat swollen cell lines で intentionally に raised plus し て い た. The In vitro で の 発 now の raised を recognize め た た に め, time In vivo に お け る 発 now レ ベ ル を parsing す る こ と に し た. Now, clinical symptoms, ス テ ー ジ, after to を リ ス ト change し た blood vessels や old meat swelling patients と normal human blood vessels swell の organization を immune dyeing し て い る in most で あ る. そ の immune dyeing results の を も と に と phase after planning move や to masato す る か beg す 検 る designated で あ る. に at the same time, active type TGF - beta と let body と の mutual masato is の beg す 検 る た め, normal と vascular endothelial cells swollen cell lines に お け る medium, の TGF - beta の レ ベ ル を determination し た. The results showed that normal vascular endothelial cells よ <s:1> vascular abscoma cell line にお にお て, and the <s:1> TGF-β レベ レベ in the culture medium was low を and recognized めた. Time に, TGF - beta の influence を べ る た め, TGF - beta cells を に add し, TGF - beta タ イ プ II by let body と ALK1 お よ び ALK5 の イ ム ノ ブ ロ ッ テ ィ ン グ を line う designated だ が, try 薬 の supply between が に close わ ず, standby state の で あ る.