Importinαの新規分子認識機構の解明

阐明Importinα的新型分子识别机制

• 批准号: 26891032
• 负责人: 宮本 洋一
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: 独立行政法人医薬基盤研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-08-29 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26891032/
• 关键词: 核-細胞質間輸送; Importin alpha; 核移行シグナル

核移行シグナル受容体分子importin αのC末端約120アミノ酸（C末端酸性領域：アルマジロリピート9-10と酸性アミノ酸クラスター）は、異なる種間でよく保存された特徴的な領域である。本研究は、このC末端酸性領域が持つ潜在的な基質認識活性に着目し、importin αの新たな分子認識の側面を明らかにすることを目的とするものである。先行研究において、我々はGST融合型importin α2(マウス、KPNA2)に相互作用する分子を ラットの精巣より探索し、そのうちC末端酸性領域結合配列(importin α C-terminal binding segment: iCBS)を持つものとしてSMARCA4/BRG1を同定していた(Arjomand et al.,FASEB J., 2014)。今回、FLAGタグを融合したimportin α2のヒトホモログimportin α1(KPNA2)ならびにヒトimportin α8(KPNA7)それぞれの安定発現HEK293細胞株を用いたプロテオミクス解析を行い、計250の結合候補分子を同定し、その中にSMARCA4/BRG1が存在することを見出した。さらに、importin α1結合候補分子中に別のサブタイプであるimportin α6が、importin α8結合候補分子にimportin α3が存在しており、importin αがヘテロダイマーを形成する可能性を示唆した。また、本研究では光架橋性側鎖を持つ非天然アミノ酸、パラベンゾイルフェニルアラニン(BPA)を用いた部位特異的光架橋法を用いて、Nup153やSMARCA4/BRG1のiCBS認識に重要なアミノ酸を同定することを目的の１つとしている。すでに、この実験に用いるマウスimportin α2変異体を４種類作製することに成功している。

Nuclear migration シ グ ナ ル by molecular importin alpha の let body C terminal 120 ア ミ ノ acid (C terminal acidic areas: ア ル マ ジ ロ リ ピ ー ト 9-10 と acid ア ミ ノ acid ク ラ ス タ ー) は, different な る interspecific で よ く save さ れ た な field of 徴 で あ る. は, this study こ の が hold つ acid field potential at the end of the C な matrix known active に し, importin alpha の new た な molecular recognition の side を Ming ら か に す る こ と を purpose と す る も の で あ る. Leading research に お い て, I 々 は GST fusion type importin alpha 2 (マ ウ ス, KPNA2) に interaction す る molecular を ラ ッ ト の fine 巣 よ り exploring し, そ の う ち C terminal combined with acidic field column (importin alpha C - terminal binding segment: ICBS) を hold つ も の と し て SMARCA4 / depletion を with fixed し て い た (Arjomand et al., FASEB J., 2014). This back, FLAG タ グ を fusion し た importin alpha 2 の ヒ ト ホ モ ロ グ importin alpha 1 (KPNA2) な ら び に ヒ ト importin Alpha 8 (KPNA7) そ れ ぞ れ の settle 発 HEK293 cell lines を now use い た プ ロ テ オ ミ ク ス parsing を い, 250 の combined with molecular を alternate with し, そ の in に SMARCA4 / depletion が exist す る こ と を shows し た. さ ら に, importin alpha 1 combined with alternate molecular に don't の サ ブ タ イ プ で あ る importin alpha 6 が, importin alpha 8 combined with alternate molecular に importin alpha 3 が exist し て お り, importin alpha が ヘ テ ロ ダ イ マ ー を form す を る possibility in stopping し た. ま た, this study で は light bridge sexual side chain を hold つ unnatural ア ミ ノ acid, パ ラ ベ ン ゾ イ ル フ ェ ニ ル ア ラ ニ ン (BPA) を い bridging た site specific light を with い て, Nup153 や SMARCA4 / depletion の iCBS know に important な ア ミ を ノ acid with fixed す る こ と を purpose の 1 つ と し て い る. す で に, こ の be 験 に with い る マ ウ ス importin alpha 2 - variant を 4 kinds cropping す る こ と に successful し て い る.

项目成果

核内輸送因子Importin αとヒストン結合タンパクRBBP4の非典型的結合とその結合意義

核转运因子 Importin α 与组蛋白结合蛋白 RBBP4 之间的非典型结合及其意义

• 发表时间: 2014
• 作者: 辻井 聡;宮本 洋一;盛山 哲嗣;岡 正啓;米田 悦啓
• 通讯作者: 米田 悦啓

STK35は生殖器と眼の発生およびストレス応答に重要である

STK35 对于生殖器和眼睛发育以及压力反应很重要

• 发表时间: 2014
• 作者: 宮本洋一;Whiley P.A.W.;Goh H.Y.;Wong C.;Higgins G.;立花太郎;McMenamin P.;Mayne L.;Loveland K.L.
• 通讯作者: Loveland K.L.

細胞ストレスと精子形成を制御するImportin αの機能

Importin α 在调节细胞应激和精子发生中的功能

• 发表时间: 2014
• 作者: Yamamoto M;Nishio T;宮本洋一
• 通讯作者: 宮本洋一

核内輸送因子Importin αとヒストン結合タンパクRBBP4の非典型的結合

核转运因子 Importin α 与组蛋白结合蛋白 RBBP4 之间的非典型结合

• 发表时间: 2014
• 作者: 辻井 聡;宮本 洋一;盛山 哲嗣;岡 正啓;米田 悦啓
• 通讯作者: 米田 悦啓

Functional Dynamics of Importin α family

Importin α家族的功能动力学

• DOI: 10.14952/seikagaku.2015.870016
• 发表时间: 2015
• 期刊: 生化学
• 作者: 宮本洋一;盛山哲嗣
• 通讯作者: 盛山哲嗣