口腔扁平上皮癌における腫瘍血管内皮細胞と腫瘍関連マクロファージの役割

肿瘤血管内皮细胞和肿瘤相关巨噬细胞在口腔鳞状细胞癌中的作用

基本信息

批准号：
26893070
负责人：
佐藤潔
金额：
$ 1.75万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-08-29 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26893070/
关键词：
歯学癌細胞・組織病理学

项目摘要

今年度はまず腫瘍関連マクロファージに焦点をあてて研究を行った。in vitroにおいて口腔癌がマクロファージに及ぼす影響を解析する為に以下の実験を行った。マウス単球白血病由来細胞株であるRAW264.7細胞をヒト口腔癌細胞株HSC3およびHSC4から作成した培養上清を添加し培養した後に、RNAを抽出しreal time qPCRにて解析した。HSC3細胞の培養上清を添加した群ではVegfCの発現が有意に上昇していた。またHSC4細胞の培養上清を添加した群ではVegfAとVegfCの発現のいずれも有意に上昇していた。これらの結果より口腔癌はTAMに作用し、VegfCなどの因子を介してリンパ管浸潤やリンパ節転移が誘導されている可能性が示唆された。次いでin vivoにおいて6週齢のBALB/c Slc-nu/nuマウスの頭蓋部皮下にHSC3およびHo-1-N-1細胞を移植した。2ないし3週間後に屠殺し病理組織学的に解析を行いマクロファージ様の多核細胞の存在を認めた。さらに4週齢のBALB/c Slc-nu/nuマウスの頭蓋部皮下にHSC3を移植しその2週間後にマウス間葉系細胞株であるST-2細胞を移植しその影響を調べた。癌細胞周囲にST-2細胞を移植することで、腫瘍の増殖能と骨破壊を促進する傾向を認めた。またさらにヒトの口腔癌に近似した動物モデルの作成を目的として、咬筋部に口腔癌細胞株を移植する動物モデルの開発および実験への応用を検討している。今後、ヒト検体にてTAMの存在や分布と予後や悪性度との関連などを検討しその役割を明らかにしていく予定である。またTAMが産生すると考えられるケモカインに焦点をあて、分子メカニズムを解析していく予定である。その成果により、口腔扁平上皮癌の病態の理解を深め、癌の増殖や浸潤などの予後予測や、新規治療法の開発への応用が期待できる。

今年，我们首先进行了研究，重点是肿瘤相关的巨噬细胞。进行了以下实验，以分析口腔癌对体外巨噬细胞的影响。 RAW264.7细胞是一种衍生自小鼠单核细胞白血病的细胞系，通过添加从人口腔癌细胞系HSC3和HSC4制备的培养上清液进行培养，然后通过实时QPCR提取RNA并分析RNA。在加入HSC3细胞培养上清液的组中，VEGFC的表达显着增加。此外，在添加HSC4细胞培养上清液的组中，VEGFA和VEGFC表达均显着增加。这些结果表明，口腔癌可能作用于TAM，并可能通过VEGFC等因素诱导淋巴侵袭和淋巴结转移。然后将HSC3和HO-1-N-1细胞在体内植入6周大的BALB/C SLC-NU/NU小鼠的头皮中。 2至3周后，处死细胞并在组织病理学上分析，以揭示存在巨噬细胞样的多核细胞的存在。此外，将HSC3植入了4周大的BALB/C SLC-NU/NU小鼠的头骨下，两周后植入了间充质细胞系的ST-2细胞研究该作用。癌细胞周围的ST-2细胞的移植显示出促进肿瘤生长潜力和骨骼破坏的趋势。此外，为了创建近似人口腔癌的动物模型，我们正在考虑开发和应用动物模型以将口腔癌细胞系植入咬合肌肉中。将来，我们计划研究人类标本中TAM的存在和分布，并阐明其作用，例如预后与恶性肿瘤之间的关系。我们还将重点关注TAM产生和分析分子机制的趋化因子。可以预期的结果可以加深我们对口服鳞状细胞癌病理学的理解，预测诸如癌症增殖和侵袭等预后，并开发新的治疗方法。