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Analysis of gingival epithelial cells and fibroblast using three-dimensional culture system mimic to periodontal pockets

使用模拟牙周袋的三维培养系统分析牙龈上皮细胞和成纤维细胞

基本信息

批准号：
15592189
负责人：
NAKAE Hideaki
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

To investigate the mechanisms that periodontopathic bacteria cause periodontal tissue destruction we established the three-dimensional co-culture gingival epithelial cell and fibroblast) system using PIPAAm. Gingival epithelial cells were seeded to Rep Cell plate (CellSeed, Tokyo) and were incubated to confluent. Then, epithelial cells were incubated at 32℃ for 30 min. After the incubation epithelial cells were removed as a cell sheet. Then the epithelial cell sheet was placed onto fibroblasts cultured in type 1 collagen. After co-culture of epithelial cells and fibroblasts for a week, we obtained the three-dimensional gingiva-reconstructive culture mimic to periodontal pockets. We compared the expression of claudin, cadherin, JAM-1, component of tight junction and adherence junction, in normal gingival to that of the three-dimensional gingiva-reconstructive culture. The expression pattern of claudin, cadherin, and JAM-1 in the three-dimensional gingiva-reconstructive culture was identical to that of normal gingival.Then, we examined the expression pattern of claudins in human periodontal pockets. In human periodontal pockets claudins-1, 4, 7, 12 were expressed constitutively. Moreover, those claudins were detected in three-dimensional gingiva-reconstructive culture. This data suggested that our three-dimensional gingiva-reconstructive culture was a useful tool to investigate the interaction between periodontal pockets and perioidontopathic bacteria. In inflamed tissues, the expression level of claudin-10 was much increased than in normal tissues. Though the mechanism of this phenomenon is unclear, this data suggested that claudin-10 played important role in developing periodontal tissue destruction.

为了探讨牙周病原菌引起牙周组织破坏的机制，我们建立了PIPAAm三维共培养体系。将牙龈上皮细胞接种于东京CellSeed的Rep Cell板上，培养至融合。然后，将上皮细胞在32℃条件下孵育30min。孵育后，取上皮细胞作为细胞膜。然后将上皮细胞片放置在以1型胶原培养的成纤维细胞上。将上皮细胞和成纤维细胞共培养一周后，我们得到了模拟牙周袋的三维牙龈重建培养物。我们比较了三维牙龈重建培养和正常牙周组织中紧密连接和粘连连接成分claudin、cadherin、JAM-1的表达情况。克拉丁、钙粘附素和JAM-1在三维牙龈重建培养中的表达模式与正常牙周组织中相同。在人牙周袋中，Claudins-1、4、7、12呈结构性表达。此外，在三维牙龈重建培养中也检测到了这些克拉丁。这一数据表明，我们的三维牙龈重建培养是一种有用的工具，可以研究牙周袋和牙周病细菌之间的相互作用。在炎症组织中，claudin-10的表达水平明显高于正常组织。虽然这种现象的机制尚不清楚，但这一数据表明，claudin-10在牙周组织破坏的发生中发挥了重要作用。

项目成果

期刊论文数量（15）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

D.Yamaguchi et al.: "Expression of Macrophage Inflammatory Protein-3alpha/CCL20 in human gingival epithelial cells"Journal of Dental Research. 82(Special Issue). 224-224 (2003)

D.Yamaguchi 等人：“巨噬细胞炎症蛋白-3α/CCL20 在人牙龈上皮细胞中的表达”牙科研究杂志。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

THP-1細胞からのサイトカイン産生におけるStreptococcus mutansの影響について

变形链球菌对 THP-1 细胞细胞因子产生的影响

DOI：
发表时间：
2003
期刊：
日本免疫学会総会・学術集会記録 33
影响因子：
0
作者：
Fusanori Nishimura;et al.;Tadashi Nakanishi et al.;細川義隆ら;Yoshitaka Hosokawa et al.;細川義隆;Daisuke Yamaguchi et al.;Hisanori Goto;高橋加奈子ら
通讯作者：
高橋加奈子ら

Analysis of CXCL12 production by human gingival fibroblast and the role of CXCL12 on human gingival fibroblast

人牙龈成纤维细胞产生CXCL12的分析及CXCL12对人牙龈成纤维细胞的作用

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Journal of Japanese Society of Peridontology 46
影响因子：
0
作者：
Fusanori Nishimura;et al.;Tadashi Nakanishi et al.;細川義隆ら;Yoshitaka Hosokawa et al.
通讯作者：
Yoshitaka Hosokawa et al.

高橋加奈子ほか: "THP-1細胞からのサイトカイン産生におけるStreptococcus mutansの影響について"日本免疫学会総会・学術記録. 33. 191-191 (2003)

Kanako Takahashi 等人：“变形链球菌对 THP-1 细胞细胞因子产生的影响”日本免疫学会年会和学术记录 33. 191-191 (2003)。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Expression of Fractalkine (CX3CL1) and its Receptor, CX3CR1, in Periodontal Diseased Tissue.

Fractalkine (CX3CL1) 及其受体 CX3CR1 在牙周病组织中的表达。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Clinical and Experimental Immunology 136・3
影响因子：
0
作者：
柳田学;中野英樹(共著);Yoshitaka Hosokawa et al.;Yoshitaka Hosokawa et al.;細川義隆ら;細川義隆ら;Yoshitaka Hosokawa
通讯作者：
Yoshitaka Hosokawa