1細胞検出能を有する多色多機能蛍光プローブ群による高精度がん検出の実現

利用具有单细胞检测能力的多色多功能荧光探针实现高精度癌症检测

基本信息

  • 批准号:
    22H02193
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 11.15万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

研究代表者らのこれまでの検討で、1細胞検出能を有する蛍光プローブを開発するためには、酵素反応後に生成する活性中間体がアザキノンメチドよりもキノンメチドの方が適切という分子設計指針が得られており、さらに本知見に基づき、gamma-glutamyltranspeptidase (GGT)との反応後にキノンメチド活性中間体が生成する蛍光プローブを設計・開発した。そこで本年度においては、本プローブを用いたさらなる応用と評価を行った。まず、GGT高発現細胞とGGT低発現細胞の共培養系に適用し、GGT高発現細胞の特異的染色が可能か検討したところ、GGT高発現細胞における蛍光強度が高く、これらの染め分けが可能であることが明らかとなった。一方で、2種類の細胞がごく近傍に存在するときは多少の漏れこみが観察されることがあった。また、本プローブが生きた組織におけるGGT活性を蛍光検出可能か検討するべく、一部の領域にGGTを発現するショウジョウバエ組織に適用し蛍光イメージングを行ったところ、GGTを高発現する細胞領域を検出できることを確認した。一方で、培養細胞を用いたときと同様、非標的細胞領域への多少の漏れこみが観察されるケースもあり、これは細胞内酵素を標的とした蛍光プローブでは観察されなかったことから、細胞膜上の酵素を標的とした場合に特徴的で、加水分解生成物が細胞外で拡散するためと考察された。本成果について、現在投稿論文準備中である。また、これまでに開発したプローブとは異なる波長域で機能する新たな蛍光プローブの開発を目指し、色素母核を変更したパイロットプローブの合成にも取り組んだ。
Research Representative: 1. The development of a cellular pathway, the production of an enzyme pathway, the production of an active intermediate, and the development of a molecular design guideline. Gamma-glutamyl transptidase (GGT) and its derivatives were designed and developed for the production of photoactive intermediates. This year's edition of the book is published in Chinese. The co-culture system of GGT, GGT high expression cells and GGT low expression cells is suitable for the specific staining of GGT high expression cells. One side, two kinds of cells exist nearby. In addition, it is possible to detect GGT activity by fluorescence in tissues where GGT is found, and it is possible to conduct fluorescence monitoring in various tissues where GGT is found in some fields, and it is confirmed that GGT is found to be highly present in the cellular field. In the case of cell culture, the enzyme target in the cell membrane is characterized by the extracellular dispersion of the hydrolysis product. This work is currently being prepared. In addition, the development of new light sources and the synthesis of pigment nuclei in different wavelength regions are also discussed.

项目成果

期刊论文数量(10)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
がん細胞の蛍光イメージング技術
癌细胞荧光成像技术
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Activatable型蛍光プローブの精密設計による迅速がん検出
通过精确设计可激活荧光探针快速检测癌症
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yamazaki Moe;Ikeda Keisuke;Kameda Tomoshi;Nakao Hiroyuki;Nakano Minoru;神谷真子
  • 通讯作者:
    神谷真子
細胞内Click 反応によるLAT1 発現がんの蛍光イメージング
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    伊藤廉;神谷真子;浦野泰照
  • 通讯作者:
    浦野泰照
化学プローブの精密設計による バイオイメージング
通过化学探针的精确设计进行生物成像
  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Shimizu Chinatsu;Ikeda Keisuke;Nakao Hiroyuki;Nakano Minoru;神谷真子
  • 通讯作者:
    神谷真子
Measuring the pH of Acidic Vesicles in Live Cells with an Optimized Fluorescence Lifetime Imaging Probe
  • DOI:
    10.1021/acs.analchem.2c01840
  • 发表时间:
    2022-08-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    7.4
  • 作者:
    Koda,Kinuko;Keller,Sascha;Urano,Yasuteru
  • 通讯作者:
    Urano,Yasuteru
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  • 资助金额:
    $ 11.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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