超解像・一分子イメージングによる微小管内腔結合タンパク質の解析

使用超分辨率/单分子成像分析微管腔结合蛋白

• 批准号: 22H02798
• 负责人: 岡田 康志
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02798/
• 关键词: 微小管; 一分子計測; 微小管内腔結合タンパク質; 一分子イメージング; 超解像顕微鏡法

本研究では、微小管内腔結合タンパク質(microtubule inner proteins, MIPs)について、軸糸微小管以外の細胞質微小管にも存在するのだろうか？　また、MIPsが微小管のどこから内腔に進入し、どのように、そしてどのような機能を果たすのか、という問いに答えることを目的としている。そのために、近接ラベル法により微小管内腔に局在するタンパク質を網羅的に検索する。また、超解像ライブイメージング法、高速高分解能一分子計測とクライオ電子顕微鏡法を組み合わせる。これにより、① 細胞質微小管MIPsの網羅的同定、② MIPsは細胞内のどの微小管のどこから内腔に進入するのか、③ MIPsは細胞内でどのような機能を果たすのか、の3つの問いにアプローチする。① については、MIPsの網羅的検索のために、微小管内腔側と表面側にビオチン化酵素(TurboID)を導入した細胞をそれぞれ作成し、選択的に微小管内腔側あるいは外側表面を標識できるかの条件検討を開始した。② については、MIPs動態計測の基礎として、αTATをモデル系とした蛍光一分子イメージングに着手した。細胞内での計測結果から、互いに矛盾する2つの先行研究の結果についての統一的な解釈を示唆する結果が得られた。③ については、高い分解能でMIPsの微小管に対する局在を可視化するため、ナノメートル分解能の超解像蛍光顕微鏡法の技術開発にとりくみ、予備的な結果が得られつつある。

In this study, the combination of microtubule lumen and microtubule (microtubule inner proteins, MIPs) microtubule, microtubule and microtubule. The microtubule, MIPs, microtubule, microtubule and microtubule. The proximity method is used to verify the location of the microtubule cavity in the network. The combination of high-speed, high-resolution, high-speed and high-resolution. The identity of the 1-cell microtubule MIPs network, 2-MIPs intracellular microtubules, 3-cell microtubules, and 3-cell microtubules. 1. In the MIPs network, the microtubule surface enzyme (TurboID) is injected into the microtubule cell, and the selected microtubule intraluminal surface marker starts. 2. The basic data of the MIPs dynamic program, the alpha-TAT, and the alpha-DNA are all the components of the system. The results of the intracellular glucose program and the contradiction between the two groups were studied in advance. The results showed that the results of the unified system showed that the results were satisfactory. 3. High temperature and high temperature decomposition can be performed by MIPs microtubes. The results of optical microanalysis show that the results of optical microanalysis are effective.

项目成果

機械学習・人工知能を活用したライブセルイメージング

使用机器学习和人工智能的活细胞成像

• 发表时间: 2023
• 作者: Saji Takeshi;Nishita Michiru;Ikeda Kazuho;Endo Mitsuharu;Okada Yasushi;Minami Yasuhiro;岡田 康志
• 通讯作者: 岡田 康志

蛍光ライブセルイメージングの限界への挑戦

挑战荧光活细胞成像的极限

• 发表时间: 2023
• 作者: Saji Takeshi;Nishita Michiru;Ikeda Kazuho;Endo Mitsuharu;Okada Yasushi;Minami Yasuhiro;岡田 康志;岡田 康志
• 通讯作者: 岡田 康志

シン・ライブセルイメージング

Shin活细胞成像

• 发表时间: 2022
• 作者: 岡田 康志

分子・細胞のライブイメージングからバイオDXへ

从分子和细胞的实时成像到bioDX

• 发表时间: 2022
• 作者: Yunce WANG;渡邉裕介;田中裕樹;岩瀬晃康;栗原裕基;八代健太;川村晃久;中川修;岡田 康志
• 通讯作者: 岡田 康志

Toward super spatiotemporal resolution fluorescence microscope for live imaging of molecules and cells

用于分子和细胞实时成像的超时空分辨率荧光显微镜

• 发表时间: 2022
• 作者: Yunce WANG;渡邉裕介;田中裕樹;岩瀬晃康;栗原裕基;八代健太;川村晃久;中川修;岡田 康志;岡田 康志;岡田 康志
• 通讯作者: 岡田 康志