Elucidation of the universal aggravation mechanisms caused by emerging viruses focusing on small viral RNAs

阐明以小病毒RNA为重点的新兴病毒引起的普遍加重机制

基本信息

  • 批准号:
    22H02879
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 11.07万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2026-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

培養細胞を用いた感染実験により、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)は季節性コロナウイルス(HCoV-OC43及び229E)と同様に効率的にヒト細胞で増殖する一方dえ、SARS-CoV-2のみが感染後期にIFN産生を誘導する事象を見出した。ウイルス感染細胞から精製したRNA分画を細胞導入したところ、SARS-CoV-2感染細胞を由来とするsmall RNA分画のみがIFN誘導能を示したため、このRNAの同定を試みた。small viral RNA(svRNA)を効率的に解読するRNA-seq法を構築することで、HCoVと異なり、SARS-CoV-2がウイルスゲノムRNAの5’末端断片(5’ end svRNA)を大量に産生することが分かった。5’ end svRNAは、5’ triphosphateと末端63塩基によるRNA2次構造の存在によってRIG-Iを刺激していた。ヒト気道再構築モデルを用いたex vivo感染実験により、OC43と異なり、SARS-CoV-2が感染後期に5’ end svRNAを蓄積させてIFN応答を惹起することを明らかにした。また、SARS-CoV-2変異株間で5’ end svRNA産生量に相違があり、これは臨床的に報告されているウイルス病原性の違いと一致した。5’ end svRNAがウイルス複製に機能を持つのか評価するために、実験的な補完実験をおこなった。その結果、細胞内の5’ end svRNA量を100倍以上に増加させてもSARS-CoV-2 RNA複製量は変化しなかった。このことから、5’ end svRNAはウイルス複製自体を制御する役割はなく、異常なRNA複製の副産物として蓄積すると推察された。
The infection of cultured cells in the middle, the induction of IFN production in SARS-CoV-2 and SARS-CoV-2 in the late stage of infection, and the seasonal infection of SARS-CoV-2 (HCoV-OC43 and 229E) with the same efficiency were also observed. Small RNA analysis of SARS-CoV-2 infected cells Small viral RNA (svRNA) is produced in large quantities by RNA-seq method for the construction of small viral RNA (svRNA) 5 'end fragments such as HCoV and SARS-CoV-2. 5 'end svRNA, 5' triphosphate terminal 63 'base, RNA secondary structure exists and RIG-I is stimulated. In the late stage of infection, 5 'end svRNA accumulation and IFN-1 response were induced by OC43 and SARS-CoV-2. The 5 'end svRNA production of SARS-CoV-2 was consistent with that of SARS-CoV-2 in clinical reports 5 'end svRNA is a complete copy of the function. As a result, the amount of SARS-CoV-2 RNA in cells increased by more than 100 times, and the amount of SARS-CoV-2 RNA replication decreased. The 5 'end of svRNA can be used to detect the accumulation of abnormal RNA replication byproducts.

项目成果

期刊论文数量(7)
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专利数量(0)
京都府立医科大学プレスリリース
京都府立医科大学新闻稿
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マイナビニュース
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
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    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
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